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抚生试剂-IL-18的检测

阅读:169发布时间:2014-5-14

IL-18的检测
 

(1)C3H/H2J小鼠脾细胞增殖法:用ConA(5ug/mL)和系列稀释的IL-18样品共同刺激诱导IFN-y产生。再用ELISA法或病毒抑制试验检测细胞培养上清液中的IFN-7含量或活性,以此推测IL-18的活性。

 

    (2)人PBMC增殖法:取3×106/mLPBMC培养在含10%FCS的RPMI-1640培养液中,加入不同浓度的诱导剂(抗CD3抗体0.1ug/mL或10U/mL IL-2或ConA0.5ug/ml)和系列稀释的人IL-18待检样品。置37℃5%C02温箱中培养24h,用ELISA法或病毒抑制试验检测细胞培养上清液中的IFN-7含量或活性,以此推测IL-18的活性。1个单位的IL-18活性为IL-18与0.5ug/mLConA共刺激时,能诱导0.25mLPBMC(7.5X105细胞)产生1601U/mLIFN-y所需的IL-18量。

 

    (3)51Cr释放试验:此法可检测IL-18诱导NK细胞杀伤K562细胞的能力,将人PBMC与系列稀释的IL-18样品共孵育24h,然后测定PBMC中的NK细胞活性。


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