96T人组胺,HISELISA试剂盒说明书
使用说明书
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测，7个工作日出结果，提供原始数据！
检测范围：每种的检测范围都有所不同,具体请查看说明书
特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的指标，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月
预期应用：ELISA法检测指标血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中含量或灵敏度。
96T人组胺,HISELISA试剂盒说明书实验原理
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、*化的抗指标抗体、HRP标记的亲和素，经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
需要而未提供的试剂和器材
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，用多通道移液器
6. 蒸馏水，容量瓶等1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。
2. 标准品（Standard）：2瓶。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. *标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. *标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
96T人组胺,HISELISA试剂盒说明书
操作步骤
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加*标记抗体工作液 100μl（取1μl*标记抗体加99μl*标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，200μl/每孔，甩干。 产品名中文（英文）酶联免疫吸附测定试剂盒
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同*标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，200μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔显色不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
Human Leukotriene B4,LT-B4 人白三烯B4（LTB4）
Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP 人肠脂肪酸结合蛋白（iFABP）
Rat nitric oxide,NO 大鼠一氧化氮（NO）
Human oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL 人氧化低密度脂蛋白（OxLDL）
Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1,MPIF-1 人骨髓抑制因子1（MPIF-1/CCL23）
Human adiponectin,ADP 人脂联素（ADP）
human Histamine,HIS 人组胺（HIS）
human Resistin 人抵抗素（Resistin）
Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B 人骨特异性碱性磷酸酶B（ALP-B）
Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP 人骨钙素/骨*蛋白（OT/BGP）
Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL 人可溶性核因子κB受体活化因子配基（sRANKL）
Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,DVD/DHVD 3 人1,25二羟基*3（1,25-（OH）2D3/DVD/DHVD 3）
Human histon-H2b 人组蛋白H2b（histon-H2b）
Human Osteoprotegerin,OPG 人骨保护素（OPG）
Human Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ 人骨成型蛋白受体Ⅱ（BMPR-Ⅱ）
Human Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A 人骨成型蛋白受体1A（BMPR-1A）
Human Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Ki 人骨成型蛋白4（BMP-4）
Human Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 人骨成型蛋白2（BMP-2）
Human cyclic adenosine monophosphate,cAMP 人*（cAMP）
Human mannan binding lectin associated serine protease,MASP 人甘露聚糖结合凝集素相关*蛋白酶（MASP）
Human Cyclin-dependent kinase 7,CDK-7 人周期素依赖性激酶7（CDK-7）
