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ELISA检测过程中的注意事项

阅读:222发布时间:2015-3-27

(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

 

(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。ELISA吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

 

(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法"(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

 

(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。

小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒 ,英文名: AFP-L2 ELISA Kit
小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA试剂盒 ,英文名: AFP-L1 ELISA Kit
相扑结合酶UBC9(UBE2I/UBC9/UBCE9)ELISA试剂盒 ,英文名: UBE2I/UBC9/UBCE9 ELISA Kit
腺相关病毒(AAV)ELISA试剂盒 ,英文名: AAV ELISA Kit
腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒 ,英文名: ADA ELISA Kit
腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA试剂盒 ,英文名: AC-1 ELISA Kit
腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)ELISA试剂盒 ,英文名: ABCG2 ELISA Kit
腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒 ,英文名: ABCA1 ELISA Kit
腺苷三磷酸结合盒转运蛋白G2(ABCG2)ELISA试剂盒 ,英文名: ABCG2 ELISA Kit
线粒体肽蛋氨酸亚砜还原酶(MSRA)ELISA试剂盒 ,英文名: MSRA ELISA Kit
衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒 ,英文名: APAF1 ELISA Kit
酰基化饥饿素(AG)ELISA试剂盒 ,英文名: AG ELISA Kit
酰化刺激蛋白(ASP)ELISA试剂盒 ,英文名: ASP ELISA Kit
纤维母细胞生长因子受体1癌基因伴侣(FGFR1OP)ELISA试剂盒 ,英文名: FGFR1OP ELISA Kit
纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA试剂盒 ,英文名: FSP ELISA Kit
纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA试剂盒 ,英文名: FRA ELISA Kit
纤维连接蛋白(FN)ELISA试剂盒 ,英文名: FN ELISA Kit
纤维介素蛋白(fgl2)ELISA试剂盒 ,英文名: fgl2 ELISA Kit
纤维胶凝蛋白3(FCN3)ELISA试剂盒 ,英文名: FCN3 ELISA Kit
纤维蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒 ,英文名: FDP ELISA Kit
纤维蛋白原α链(FGA)ELISA试剂盒 ,英文名: FGA ELISA Kit
纤维蛋白原(Fb)ELISA试剂盒 ,英文名: Fb ELISA Kit
纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒 ,英文名: PL/Fbn ELISA Kit
纤维蛋白(Fibrin)ELISA试剂盒 ,英文名: Fibrin ELISA Kit
纤调蛋白(FMOD)ELISA试剂盒 ,英文名: FMOD ELISA Kit
纤溶抑制因子/*激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒 ,英文名: TAFI ELISA Kit
纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒 ,英文名: PAI-1 ELISA Kit
纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒 ,英文名: PAI ELISA Kit
纤溶酶原激活剂抑制物(PAI-1)ELISA试剂盒 ,英文名: PAI-1 ELISA Kit
纤溶酶原激活剂(PLGA)ELISA试剂盒 ,英文名: PLGA ELISA Kit
纤溶酶原(Plg)ELISA试剂盒 ,英文名: Plg ELISA Kit
纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒 ,英文名: PAP ELISA Kit
纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒 ,英文名: PL/Fbn ELISA Kit
纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒 ,英文名: FN ELISA Kit
*ELISA试剂盒 ,英文名: BV ELISA Kit
细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒 ,英文名: Cyclin-D3 ELISA Kit
细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒 ,英文名: Cyclin-D2 ELISA Kit
细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒 ,英文名: Cyclin-D1 ELISA Kit
细胞周期素A2(Cyclin-A2)ELISA试剂盒 ,英文名: Cyclin-A2 ELISA Kit
细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)ELISA试剂盒 ,英文名: CDK2 ELISA Kit
细胞周期蛋白A1(CCNA1)ELISA试剂盒 ,英文名: CCNA1 ELISA Kit
细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)ELISA试剂盒 ,英文名: SOCS-3 ELISA Kit
细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS-1)ELISA试剂盒 ,英文名: SOCS-1 ELISA Kit
细胞纤维连接蛋白(cFn)ELISA试剂盒 ,英文名: cFn ELISA Kit
细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒 ,英文名: MEPE ELISA Kit
细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP21B ELISA Kit
细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP21A ELISA Kit
细胞色素P450(CYP450)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP450 ELISA Kit
*氧化酶Ⅵα亚基多肽1(COX6A1)ELISA试剂盒 ,英文名: COX6A1 ELISA Kit
*氧化酶(COX)ELISA试剂盒 ,英文名: COX ELISA Kit
*-1(CYC1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYC1 ELISA Kit
*(Cyt-C)ELISA试剂盒 ,英文名: Cyt-C ELISA Kit
细胞色素b561(cytb561)ELISA试剂盒 ,英文名: cytb561 ELISA Kit
细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(cytovillin/ezrin)ELISA试剂盒 ,英文名: cytovillin/ezrin ELISA Kit
细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(CVL)ELISA试剂盒 ,英文名: CVL ELISA Kit
细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA试剂盒 ,英文名: SmIg ELISA Kit
细胞膜DNA抗体(cmDNA)ELISA试剂盒 ,英文名: cmDNA ELISA Kit


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