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免费代测人雌激素ELISA 检测试剂盒的准备

阅读:213发布时间:2012-12-24

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    上海通蔚实业有限公司

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人雌激素ELISA 检测试剂盒


本试剂仅供研究使用  标本:血清或血浆

上海杰兰尔试剂公司专业供应葡聚糖凝胶HL-20,白介素elisa试剂盒,肿瘤坏死因子elisa试剂盒,人类白介抗原B27,细胞生长因子试剂盒,提供免费代测服务,保证实验结果客观真实性。我公司对试剂盒质量100%保证,若存在质量问题,我们无条件包退换 
 
试验原理:
    Estrogen试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Estrogen浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Estrogen和*标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Estrogen的浓度呈比例关系。
  
安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人雌激素ELISA 检测试剂盒

操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
 
人雌激素ELISA 检测试剂盒

操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
 
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。

试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

人雌激素ELISA 检测试剂盒

结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的Estrogen标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的Estrogen含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围:0-80ng/ml

4、敏感度: 0.1 ng/ml
Langerin/CD207/CLEC4K(C-type lectin domain family 4 member K) 白细胞分化抗原CD207抗体 0.2ml
Goat anti-bovine IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记羊抗牛IgG 0.1ml
Goat anti-bov IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记羊抗牛IgM 0.1ml
Goat anti-chi IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat anti-human IgA/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记羊抗人IgA 0.1ml
LAP18/stathmin(leukemia associated protein 18) 白血病相关蛋白18/癌蛋白18抗体 0.2ml
LAT/LAT1(Linker for activation of T cell 1) T细胞活化连接蛋白 0.2ml
LAIR-1/CD305(Leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor 1) 白细胞相关免疫球蛋白样受体1抗体 0.2ml
Layilin 透明质酸受体抗体 0.2ml
goat anti-mouse IgG(beads) 兔抗小鼠IgG 免疫磁珠 2ml
LAIR-2/CD306(Leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor 2) 白细胞相关免疫球蛋白样受体2抗体 0.2ml
LCAT(lecithin cholesterol acyl transferase) 卵磷*酰基转移酶抗体 0.2ml
LDL-R (Low-density lipoprotein receptor precursor) 低密度脂蛋白受体抗体 0.2ml
ox-LDL(oxidized low density lipoprotein) 抗氧化低密度脂蛋白抗体 0.2ml
Goat anti-mouse IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记羊抗小鼠IgM 0.1ml
Goat anti-rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记羊抗大鼠IgG 0.1ml
LEF-1(lymphoid enhancing factor-1) 淋巴增强因子-1抗体 0.2ml
Leptin 瘦素抗体 0.2ml
Leptin receptor 瘦素受体抗体 0.1ml
Leptin receptor 瘦素受体抗体 0.2ml
Leptin receptor(long) 瘦素受体抗体(长) 0.2ml

若需要了解试剂盒的详细信息,请::帅
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