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上海通蔚实业有限公司
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阅读:163发布时间:2015-04-29
上海通蔚实业有限公司
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根据试剂的来源和样本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。以下主要介绍几种公司常用的检测抗原的类型:人ELISA试剂盒的样本中的待测药物和固相化的抗原共同竞争一定量的抗体,加入酶标记抗抗体(酶标二抗)后能与固相化的抗原抗体复合物特异性结合,经底物显色后检测,样本中药物含量愈高,竞争结合的抗体量愈多,从而结合在固相上的酶标记抗抗体(酶标二抗)量愈少,zui后的显色也愈浅。本公司及国内产品多用此法。
具体操作步骤如下:
1)抗原固相化:将特异性抗原与固相载体联结,人ELISA试剂盒形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2)加入标准品/样本,再加入抗体,保温反应。样本中药物与固相抗原同时竞争与特异性抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去游离物质及吸附在固相载体上结合不紧密的物质。
3)加酶标抗抗体,人ELISA试剂盒固相免疫复合物中的抗体与酶标抗体抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检药物的量负相关。
4)加底物显色,固相上的酶催化底物成为有色产物。通过仪器检测分析,测知样本中抗原的量。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,人ELISA试剂盒又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,人ELISA试剂盒产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
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