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上海通蔚实业有限公司
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阅读:157发布时间:2019-12-26
(1) 尽可能地减少血清冻融次数。
(2) 培育基无需37℃水浴。
(3) 培育基保持zuiPH 值7.0-7.2。
(4) 严格控制制造培育基的水质,容器定期刷洗。
(5) 掌握细胞传代的zui机遇,细胞切勿生长过老。
一、化冻
将血清从-20 度冰箱中取出,室温(或浸于自来水中)化冻(约需求30分钟至2小时,也可放于4度冰箱化冻过夜;化冻后若不马上灭活,可以放入4度冰箱中暂时保存)
二、灭活
(1)放入室温的水浴锅内开端加热(一起放入一个空的血清瓶,内装100ml自来水,插入一根温度计,温度监控以此为准)
(2)当温度计显示56度时,停止加热,改为连续加热,保持56度(±0.5度)30分钟(±3分钟;若不小心使温度上升超过56度,则:若仍未超过60度,且时间很短,比如不超过5分钟,则仍可运用;若超过60度,或许时间较长,则弃去不用,或许测验用于一些一般细胞的培育)
(3)取出,天然冷却至室温(约需1-3小时),可分装或-20度继续冻存。
三、分装
(1)转入无菌间,在超净台内将血清分装入10ml离心管中(留意预先要将血清轻轻摇动数周、混匀;用吸液管或吹大管吹出血清时要留意:不要吹出气泡(血清很粘稠,很简单产生气泡;假如产生气泡, 则在酒精灯火焰上过一下)。
(2)放入-20 度冰箱冻存。
(3)全部操作约需求4-6小时。
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