咱们在培育细胞的过程中，多多少少都会遇到一些这样那样的问题，今天丰寿整理的下面这些细胞培育过程中的问题，您遇到过几个？您是怎样解决的呢？快和丰寿一起来看看正确的解决方法吧！
1.培育液pH值变化太快
>>>>原因
CO2 张力不对
培育瓶盖拧得太紧
NaHCO3 缓冲系统缓冲力不足
培育液中盐浓度不正确
细菌、酵母或真菌污染
>>>>对策
按培育液中 NaHCO3 浓度添加或减少培育箱内 CO2 浓度，2.0 g/L 到 3.7 g/L 浓度 NaHCO3 对应 CO2 浓度为 5％ 到 10％。或许改用不依赖 CO2 培育液
松开瓶盖 1/4 圈
加 HEPES 缓冲液至 10 到 25 mM 终浓度
在 CO2 培育环境中改用基于 Earle’s 盐制造的培育液，在大气培育环境中培育改用 Hank’s 盐制造的培育液
丢掉培育物或用抗生素除菌
2.培育液呈现沉积，pH 值不变
>>>>原因
用洗涤剂清洗后残留磷酸盐将培育基成分沉积下来
冰冻保存培育液
>>>>对策
用去离子水反复冲洗玻璃器皿，然后除菌
将培育液加热到 37 ℃，摇摆使其溶解如沉积依然存在，丢掉培育液
3.培育液呈现沉积，同时 pH 发生变化
>>>>原因
细菌或真菌污染
>>>>对策
丢掉培育物或用抗生素除菌
4.培育细胞不贴壁
>>>>原因
*消化过度
支原体污染
培育液中无贴壁因子
>>>>对策
缩短*消化时间或降低*浓度
分离培育物，检测支原体。清洁支架和培育箱。如发现支原体污染，丢掉培育物
改动培育液成分
5.悬浮细胞成簇
>>>>原因
培育液中含钙、镁离子支原体污染
蛋白酶过度消化使得细胞裂解开释 DNA
>>>>对策
用无钙镁*洗涤细胞，轻轻吹吸细胞取得单细胞悬液
分离培育物，检测支原体。如发现支原体污染，丢掉培育物
用 DNase I 处理细胞
