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上海通蔚实业有限公司
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阅读:209发布时间:2019-1-2
日前,我公司业务员收到上海交通大学钱老师发来的在线会话。钱老师表示出ELISA试剂盒的检测结果不理想,不知道是哪里出了问题。
钱老师说道:我自己合成8个氨基酸的抗原短肽,和BSA耦连后免疫动物,1个月后用ELISA测定血清中针对抗原短肽的抗体滴度,
具体步骤:用碳酸缓冲液溶解抗原短肽后包板,4度冰箱18小时,再用1%OVA37度封闭2小时,洗板3次。待测血清用10%小牛血清倍比稀释,37度温育1小时,洗板3次,加入二抗,37度温育40分钟,洗板3次,加TMB显色,结果比较诡异,阴性对照也显色了,且OD值和阳性差别不大。是什么原因呢?是洗板的问题吗?
对此,上海丰寿技术员回应,ELISA试剂盒结果不理想原因可以根据这几个方面分析:
1.洗板是否串孔,如串孔的话可能造成污染;你一抗、二抗每次洗板时洗5遍以上。
2.封闭液的问题,你说阴性对照也显色了,那*主要的问题应该是封闭,应重新考虑用OVA封闭是否适合,如果OVA封闭效果不好的话可以选择其他的封闭液。封闭液的选择园子里有很多相关的帖,你搜一下看看。
3.建议ELISA试剂盒包被在37度两小时,这样的效果可能会好一些。
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