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Elisa试剂盒重复性差的解决办法

阅读:620发布时间:2018-11-16

elisa试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)。已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将*标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。

elisa试剂盒重复性差的缘由:

1、样品数量多少不一,加样时间有长有短——重复某一样品时,加样时间尽可能与多次接近。

2、保温时间不一致,洗涤条件不一致,操作人员不一致——重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性。

elisa试剂盒重复性差解决方法:

1、 重复某一样品时,加样时间尽可能与多次接近。

2、样品加入后未混匀。解决方法:加样后在混匀器上充分混匀。

3、酶标仪滤光片不对或输入波长不对。解决方法:TMB显色用450/630波长。

4、酶标仪测定重复性差。解决方法:校对酶标仪。

5、洗涤不正确。解决方法:洗涤液注满各孔但不要溢出。洗板时反应板面向下,垂直用力甩净内容物(可多甩几次),在干净、无或少尘的吸水材料上拍干。洗板机洗板时不应有堵孔,洗涤应充分。

6、温育条件不一致(一次用水育,一次用恒温箱)。解决方法:恒温箱温育较水浴显色深, OD值高出0.1-0.15,均采用恒温箱.如用水浴水温应控制在37℃。


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