地龙降压胶囊对自发性高血压大鼠肾胺酶表达的影响＊

柴辉１ 刘斌１ 李应东１ 孙少伯１ 朱贝贝１ 赵信科１ 刘凯１

［摘要］   目的：观察地龙降压胶囊对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）肾胺酶表达的影响，以探讨地龙降压胶囊治疗原发性高血压的作用机制。方法：取２４只８周龄雄性ＳＨＲ，根据收缩压随机分为模型组  （等容量蒸馏水灌胃）及地龙降压胶囊高、低剂量组  （分别以地龙降压胶囊２４０ ｍｇ／ｋｇ、１２０ ｍｇ／ｋｇ 灌胃），每组８ 只。另取８ 只  ＷＫＹ 雄性大鼠作为正常对照组 （等容量蒸馏水灌胃）。分别于连续给药前、给药后第２ 周、４ 周、６ 周、８ 周测定尾动脉收缩压。末次给药后，采用 ＥＬＩＳＡ 法检测大鼠血浆儿茶酚胺和血清肾胺酶含量。采用免疫组织化学法检测大鼠肾

脏肾胺酶的表达。结果：地龙降压胶囊有效降低了 ＳＨＲ 收缩压、血浆儿茶酚胺水平（Ｐ＜０．０５）；升高了 ＳＨＲ 肾胺酶水平（Ｐ＜０．０５）。结论：地龙降压胶囊能有效降低血压，其作用机制可能是通过调节肾胺酶表达水平，从而影响血浆儿茶酚胺水平实现的。

［关键词］ 地龙降压胶囊；自发性高血压大鼠；交感神经；肾胺酶；儿茶酚胺

ｄｏｉ：１０．１３２０１／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１４３９．２０１８．０１．０１５

［中图分类号］  Ｒ５４４．１ ［文献标志码］  Ａ

ＥｆｆｅｃｔｏｆＤｉｌｏｎｇａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｃａｐｓｕｌｅｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆｒｅｎａｌａｓｅｉｎｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａｔｓ

ＣＨＡＩＨｕｉ  ＬＩＵＢｉｎ  ＬＩＹｉｎｇｄｏｎｇ  ＳＵＮＳｈａｏｂｏ ＺＨＵＢｅｉｂｅｉ  ＺＨＡＯＸｉｎｋｅ  ＬＩＵ Ｋａｉ

（ＧａｎｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｌａｎｚｈｏｕ，７３００００，Ｃｈｉｎａ）

Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＬＩＹｉｎｇｄｏｎｇ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｙｄｊ４１２＠１６３．ｃｏｍ

Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＤｉｌｏｎｇＡｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅＣａｐｓｕｌｅｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｒｅｎａｌａｓｅｉｎ ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａｔｓ（ＳＨＲ），ａｎｄｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｕｎｄｅｒｌｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ２４ｍａｌｅＳＨＲｓｏｆ８ ｗｅｅｋｓｏｌｄ ｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏ ｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ （ｇａｖａｇｅｏｆｄｉｓｔｉｌｌｅｄ ｗａｔｅｒｏｆｔｈｅｓａｍｅｖｏｌｕｍｅ），ｈｉｇｈｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐ，ｌｏｗｄｏｓｅｇｒｏｕｐ（２４０ ｍｇ／ｋｇ，１２０ ｍｇ／ｋｇ），８ｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ａｎｏｔｈｅｒ８ ＷＫＹ ｍａｌｅｒａｔｓｗｅｒｅｔａｋｅｎａｓ ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ （ｇａｖａｇｅｏｆｄｉｓｔｉｌｌｅｄ ｗａｔｅｒｏｆｔｈｅｓａｍｅｖｏｌｕｍｅ）．Ｔｈｅｃａｒｏｔｉｄｓｙｓｔｏｌｉｃｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄａｔ２ｗｅｅｋｓ，４ｗｅｅｋｓ，６ｗｅｅｋｓａｎｄ８ｗｅｅｋｓａｆｔｅｒｔｈｅｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．Ａｆｔｅｒｔｈｅｌａｓｔａｄｍｉｎｉｓ－ ｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｐｌａｓｍａｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅｓａｎｄｓｅｒｕｍｒｅｎａｌａｓｅｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙＥＬＩＳＡ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｒｅｎａｌａｓｅ ｉｎＫｉｄｎｅｙ ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｄｉｌｏｎｇ Ａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｐｓｕｌｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｒｅｄｕｃｅｄｔｈｅ

ＳＨＲｓｙｓｔｏｌｉｃｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅ，ｐｌａｓｍａｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅｌｅｖｅｌｓ（Ｐ＜０．０５）；ｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＳＨＲｒｅｎａｌａｓｅ （Ｐ＜ ０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＤｉｌｏｎｇＡｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅＣａｐｓｕｌｅｓｃａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｒｅｄｕｃｅｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅａｎｄｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｍａｙ

ｂｅｔｈｒｏｕｇｈｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｒｅｎａｌａｓｅ，ａｎｄｔｈｅｎａｆｆｅｃｔｉｎｇｐｌａｓｍａｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅｌｅｖｅｌｓ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ Ｄｉｌｏｎｇａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｃａｐｓｕｌｅ；ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａｔｓ；ｓｙｍｐａｔｈｅｔｉｃ；ｒｅｎａｌａｓｅ；ｃａｔｅ－ ｃｈｏｌａｍｉｎｅｓ

高血压是以动脉血压进行性升高为表现的心血管疾病，是心血管疾病重要的危险因素，致残率、致死率高。有研究认为原发性高血压是以交感神经过度兴奋为起点，引起儿茶酚胺分泌增加，血管收缩，进 而发生高血压并持续进展［１］。Ｍｉｌａｎｉ等［２］研究发现肾胺酶可以降解儿茶酚胺，进而调节

＊ 基金项目：甘肃省自然科学基金（Ｎｏ：１６１０ＲＪＺＡ０６８）；甘肃中医药大学研究生创新基金（Ｎｏ：ＣＸ２０１６－０８）

１ 甘肃中医药大学（兰州，７３００００）

通信作者：李应东，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｙｄｊ４１２＠１６３．ｃｏｍ

血压。地龙降压胶囊是甘肃中医药大学附属医院的院内制剂，在临床使用中对高血压有较好的治疗 效果，但是在对其作用机制的实验研究较少，尚未 发现有涉及其对交感神经系统的作用。本研究通过观察地龙降压胶囊对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血浆儿茶酚胺浓度以及血清肾胺酶水平变化的影响，探讨地龙降压胶囊的降压作用与影响肾胺酶表 达水平的关系，为其治疗高血压提供理论基础和实 验依据。

ＣＨＡＩＨｕｉ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｏｆＤｉｌｏｎｇａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｃａｐｓｕｌｅｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｒｅｎａｌａｓｅｉｎＳＨＲｓ

·６７·

１  材料与方法

１．１  实验动物

２４只ＳＨＲ 和８只 ＷＫＹＳＰＦ 级大鼠，８ 周龄，雄性，购自北京维通利华实验动物技术有限公司， 许可证编号：ＳＣＸＫ （京）２０１２－０００１。

１．２  实验药物与试剂

受试药物：地 龙降压胶囊（甘 肃中医药大学附属医院，批号：１５１０２６）；试剂：水合氯醛（天津市光复精细化工研究所，批 号：２０１５０１０５）；４％多聚 甲 醛 （北 京 索 莱 宝 科 技 有 限 公 司，批 号： ２０１６０４２９）；ＲａｔＣＡ ＥＬＩＳＡ Ｋｉｔ９６Ｔ（上海恒远生物科技有限公司，批 号：２０１６０５）；ＲｂａＲｅｎａｌａｓｅ

（北 京 博 奥 森 生 物 技 术 有 限 公 司，批 号：ＡＣ ０６０３１７５７）。

１．３  实验仪器

智能无创血压计－鼠仪 ＢＰ－９８Ａ（北京软隆生物技术有限公司）；ＪＭ－Ａ５００２ 型电子天平（诸暨市超泽衡器设备有限公司）；高 速低温离心机 （德 国Ｈｅｒａｅｕｓ公司）；微型混合器（金坛市恒丰仪器厂）； Ｉｎｆｉｎｉｔｅ２００ＰＲＯ 序列多功能酶标仪（Ｔｅｃａｎ 奥地利有限责任公司）；ＺＷＹＲ－２４０ 恒温培养振荡器（上海智城分析仪器有限公司）；ＥＧ１６００ 型包埋仪（德 国 Ｌｅｉｃａ 公司）；ＲＭ ２１３５ 型切片机 （德 国 Ｌｅｉｃａ公司）；ＯＬＹＭＰＵＳＢＸ５ 显微镜（日本 Ｏｌｙｍ－ ｐｕｓ 珠式会社）。

１．４  动物分组及给药

取８周龄雄性ＳＨＲ２４只和８周龄雄性  ＷＫＹ大鼠８只，适应性喂养１ 周后，用智能无创血压计－ 鼠仪ＢＰ－９８Ａ 测量 ＳＨＲ 收缩压，根据收缩压值查随机数字表，随机分为３ 组：模型组、地龙降压胶囊低剂量组、地龙降压胶囊高剂量组，每组８ 只。地龙降压胶囊干预组，分别以每日地龙降压胶囊低剂

化检测。

１．５．３  指标检测 血浆儿茶酚胺（ＣＡ）、血清肾胺酶（ｒｅｎａｌａｓｅ）水平测定采用酶联免疫吸附法检测，严格按照试剂盒说明进行操作。

１．６  统计学处理

采用ＳＰＳＳ２０．０ 软件进行统计学处理。数据结果符合正态分布以ｘ珚±ｓ 表示，定量资料多组间两两比较采用方差分析 （方差齐的采用 ＬＳＤ 检验，

方差不齐者采用 Ｄｕｎｎｅｔｔ'ｔ检验），以 Ｐ＜０．０５ 为差异有统计学意义。

２ 结 果

２．１  地龙降压胶囊对ＳＨＲ 收缩压的影响

与  ＷＫＹ 组比较，模型组大鼠收缩压随鼠龄增

加逐渐升高（Ｐ＜０．０５）；与模型组相比，随着给药时间的延长，地龙降压胶囊高剂量组给药第４ 周收缩

压下降有统计学差异（Ｐ＜０．０５），地龙降压胶囊低剂量组给药第６ 周收缩压下降有统计学差异  （Ｐ＜ ０．０５）；地龙降压胶囊高、低剂量组之间的差异无统

计学意义（Ｐ＞０．０５）。见表１。

２．２  地龙降压胶囊对ＳＨＲ 血浆儿茶酚胺水平、血

清肾胺酶水平的影响

与  ＷＫＹ 组比较，模型组大鼠血浆儿茶酚胺水

平升高，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；与模型组比较，地龙降压胶囊高、低剂量组大鼠血浆儿茶酚胺

水平均降低（Ｐ＜０．０５）。给药８ 周后，与  ＷＫＹ 组比较，模型组大鼠血清肾胺酶水平降低，差异有统

计学意义（Ｐ＜０．０５）；与模型组比较，各给药组大鼠血清中肾胺酶水平均升高，差异有统计学意义  （Ｐ

＜０．０５）；其中以高剂量组差异显著。见表２。

表２ 地龙降压胶囊对ＳＨＲ 儿茶酚胺和肾胺酶水平的影响

Ｔａｂｌｅ２ ＴｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆＤｉｌｏｎｇａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｃａｐｓｕｌｅｏｎ

量组１２０ ｍｇ／ｋｇ（临床成人用量的等效剂量）、地龙降压胶囊高剂量组２４０ ｍｇ／ｋｇ（临床成人用量等效剂量的２倍）灌胃。模型组给予等体积的蒸馏水灌

ｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅａｎｄｒｅｎａｌａｓｅｉｎＳＨＲ

儿茶酚胺

分组

／（μｇ·Ｌ－１）

ｘ珚±ｓ

肾胺酶

／（μｇ·ｍｌ－１）

胃。另取 ＷＫＹ 雄 性 大 鼠 ８ 只 作 为 正 常 对 照

（ＷＫＹ 组），给予等体积的蒸馏水灌胃。所有大鼠每日灌胃１次，药物干预８周。

１．５  检测指标

１．５．１  一般情况及收缩压监测     分别于连续给药前、给药后第２周、４ 周、６ 周、８ 周测定大鼠动脉血压。动脉血压用智能无创血压计－鼠仪 ＢＰ－９８Ａ，采用尾套法，给每只大鼠连续测量血压５ 次，取平均值作为测量结果。

１．５．２  样品采集及处理      干预 ８ 周实验结束后，夜 间禁食，次 日清晨腹腔注射 １０％ 水合氯醛（３ ｍｌ／ｋｇ）麻 醉，心 脏采血 ４ ｍｌ后 分离血清用于血清学检测；脱 颈椎处死后剖腹摘取完整左侧肾脏用４％ 多聚甲醛固定４８ｈ 后行免疫组

ＷＫＹ 组 ７０．９７±１４．４６   ４．３９±０．３４

模型组 １２４．８４±１７．５１１）   １．７６±０．２９１）地龙降压胶囊高剂量组     ９０．０９±１２．４４２）   ４．３７±０．２５２）地龙降压胶囊低剂量组     ９２．５８±１１．８４２）   ２．９３±０．５９１）２）

与  ＷＫＹ 组比较，１）Ｐ ＜０．０５；与 模型组比较，２）Ｐ ＜

０．０５。

２．３  肾脏肾胺酶的表达

免疫组化显示，ＷＫＹ 组大鼠肾胺酶在近端小管中高度表达，也存在于肾小球和远端小管中（棕黄色颗粒，以下同地龙降压胶囊对自发性高血压大鼠肾胺酶表达的影响＊

柴辉１ 刘斌１ 李应东１ 孙少伯１ 朱贝贝１ 赵信科１ 刘凯１

［摘要］   目的：观察地龙降压胶囊对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）肾胺酶表达的影响，以探讨地龙降压胶囊治疗原发性高血压的作用机制。方法：取２４只８周龄雄性ＳＨＲ，根据收缩压随机分为模型组  （等容量蒸馏水灌胃）及地龙降压胶囊高、低剂量组  （分别以地龙降压胶囊２４０ ｍｇ／ｋｇ、１２０ ｍｇ／ｋｇ 灌胃），每组８ 只。另取８ 只  ＷＫＹ 雄性大鼠作为正常对照组 （等容量蒸馏水灌胃）。分别于连续给药前、给药后第２ 周、４ 周、６ 周、８ 周测定尾动脉收缩压。末次给药后，采用 ＥＬＩＳＡ 法检测大鼠血浆儿茶酚胺和血清肾胺酶含量。采用免疫组织化学法检测大鼠肾

脏肾胺酶的表达。结果：地龙降压胶囊有效降低了 ＳＨＲ 收缩压、血浆儿茶酚胺水平（Ｐ＜０．０５）；升高了 ＳＨＲ 肾胺酶水平（Ｐ＜０．０５）。结论：地龙降压胶囊能有效降低血压，其作用机制可能是通过调节肾胺酶表达水平，从而影响血浆儿茶酚胺水平实现的。

［关键词］ 地龙降压胶囊；自发性高血压大鼠；交感神经；肾胺酶；儿茶酚胺

ｄｏｉ：１０．１３２０１／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１４３９．２０１８．０１．０１５

［中图分类号］  Ｒ５４４．１ ［文献标志码］  Ａ

ＥｆｆｅｃｔｏｆＤｉｌｏｎｇａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｃａｐｓｕｌｅｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆｒｅｎａｌａｓｅｉｎｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａｔｓ

ＣＨＡＩＨｕｉ  ＬＩＵＢｉｎ  ＬＩＹｉｎｇｄｏｎｇ  ＳＵＮＳｈａｏｂｏ ＺＨＵＢｅｉｂｅｉ  ＺＨＡＯＸｉｎｋｅ  ＬＩＵ Ｋａｉ

（ＧａｎｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｌａｎｚｈｏｕ，７３００００，Ｃｈｉｎａ）

Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＬＩＹｉｎｇｄｏｎｇ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｙｄｊ４１２＠１６３．ｃｏｍ

Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＤｉｌｏｎｇＡｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅＣａｐｓｕｌｅｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｒｅｎａｌａｓｅｉｎ ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａｔｓ（ＳＨＲ），ａｎｄｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｕｎｄｅｒｌｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ２４ｍａｌｅＳＨＲｓｏｆ８ ｗｅｅｋｓｏｌｄ ｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏ ｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ （ｇａｖａｇｅｏｆｄｉｓｔｉｌｌｅｄ ｗａｔｅｒｏｆｔｈｅｓａｍｅｖｏｌｕｍｅ），ｈｉｇｈｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐ，ｌｏｗｄｏｓｅｇｒｏｕｐ（２４０ ｍｇ／ｋｇ，１２０ ｍｇ／ｋｇ），８ｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ａｎｏｔｈｅｒ８ ＷＫＹ ｍａｌｅｒａｔｓｗｅｒｅｔａｋｅｎａｓ ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ （ｇａｖａｇｅｏｆｄｉｓｔｉｌｌｅｄ ｗａｔｅｒｏｆｔｈｅｓａｍｅｖｏｌｕｍｅ）．Ｔｈｅｃａｒｏｔｉｄｓｙｓｔｏｌｉｃｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄａｔ２ｗｅｅｋｓ，４ｗｅｅｋｓ，６ｗｅｅｋｓａｎｄ８ｗｅｅｋｓａｆｔｅｒｔｈｅｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．Ａｆｔｅｒｔｈｅｌａｓｔａｄｍｉｎｉｓ－ ｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｐｌａｓｍａｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅｓａｎｄｓｅｒｕｍｒｅｎａｌａｓｅｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙＥＬＩＳＡ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｒｅｎａｌａｓｅ ｉｎＫｉｄｎｅｙ ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｄｉｌｏｎｇ Ａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｐｓｕｌｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｒｅｄｕｃｅｄｔｈｅ

ＳＨＲｓｙｓｔｏｌｉｃｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅ，ｐｌａｓｍａｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅｌｅｖｅｌｓ（Ｐ＜０．０５）；ｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＳＨＲｒｅｎａｌａｓｅ （Ｐ＜ ０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＤｉｌｏｎｇＡｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅＣａｐｓｕｌｅｓｃａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｒｅｄｕｃｅｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅａｎｄｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｍａｙ

ｂｅｔｈｒｏｕｇｈｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｒｅｎａｌａｓｅ，ａｎｄｔｈｅｎａｆｆｅｃｔｉｎｇｐｌａｓｍａｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅｌｅｖｅｌｓ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ Ｄｉｌｏｎｇａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｃａｐｓｕｌｅ；ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａｔｓ；ｓｙｍｐａｔｈｅｔｉｃ；ｒｅｎａｌａｓｅ；ｃａｔｅ－ ｃｈｏｌａｍｉｎｅｓ

高血压是以动脉血压进行性升高为表现的心血管疾病，是心血管疾病重要的危险因素，致残率、致死率高。有研究认为原发性高血压是以交感神经过度兴奋为起点，引起儿茶酚胺分泌增加，血管收缩，进 而发生高血压并持续进展［１］。Ｍｉｌａｎｉ等［２］研究发现肾胺酶可以降解儿茶酚胺，进而调节

＊ 基金项目：甘肃省自然科学基金（Ｎｏ：１６１０ＲＪＺＡ０６８）；甘肃中医药大学研究生创新基金（Ｎｏ：ＣＸ２０１６－０８）

１ 甘肃中医药大学（兰州，７３００００）

通信作者：李应东，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｙｄｊ４１２＠１６３．ｃｏｍ

血压。地龙降压胶囊是甘肃中医药大学附属医院的院内制剂，在临床使用中对高血压有较好的治疗 效果，但是在对其作用机制的实验研究较少，尚未 发现有涉及其对交感神经系统的作用。本研究通过观察地龙降压胶囊对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血浆儿茶酚胺浓度以及血清肾胺酶水平变化的影响，探讨地龙降压胶囊的降压作用与影响肾胺酶表 达水平的关系，为其治疗高血压提供理论基础和实 验依据。

ＣＨＡＩＨｕｉ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｏｆＤｉｌｏｎｇａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｃａｐｓｕｌｅｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｒｅｎａｌａｓｅｉｎＳＨＲｓ

·６７·

１  材料与方法

１．１  实验动物

２４只ＳＨＲ 和８只 ＷＫＹＳＰＦ 级大鼠，８ 周龄，雄性，购自北京维通利华实验动物技术有限公司， 许可证编号：ＳＣＸＫ （京）２０１２－０００１。

１．２  实验药物与试剂

受试药物：地 龙降压胶囊（甘 肃中医药大学附属医院，批号：１５１０２６）；试剂：水合氯醛（天津市光复精细化工研究所，批 号：２０１５０１０５）；４％多聚 甲 醛 （北 京 索 莱 宝 科 技 有 限 公 司，批 号： ２０１６０４２９）；ＲａｔＣＡ ＥＬＩＳＡ Ｋｉｔ９６Ｔ（上海恒远生物科技有限公司，批 号：２０１６０５）；ＲｂａＲｅｎａｌａｓｅ

（北 京 博 奥 森 生 物 技 术 有 限 公 司，批 号：ＡＣ ０６０３１７５７）。

１．３  实验仪器

智能无创血压计－鼠仪 ＢＰ－９８Ａ（北京软隆生物技术有限公司）；ＪＭ－Ａ５００２ 型电子天平（诸暨市超泽衡器设备有限公司）；高 速低温离心机 （德 国Ｈｅｒａｅｕｓ公司）；微型混合器（金坛市恒丰仪器厂）； Ｉｎｆｉｎｉｔｅ２００ＰＲＯ 序列多功能酶标仪（Ｔｅｃａｎ 奥地利有限责任公司）；ＺＷＹＲ－２４０ 恒温培养振荡器（上海智城分析仪器有限公司）；ＥＧ１６００ 型包埋仪（德 国 Ｌｅｉｃａ 公司）；ＲＭ ２１３５ 型切片机 （德 国 Ｌｅｉｃａ公司）；ＯＬＹＭＰＵＳＢＸ５ 显微镜（日本 Ｏｌｙｍ－ ｐｕｓ 珠式会社）。

１．４  动物分组及给药

取８周龄雄性ＳＨＲ２４只和８周龄雄性  ＷＫＹ大鼠８只，适应性喂养１ 周后，用智能无创血压计－ 鼠仪ＢＰ－９８Ａ 测量 ＳＨＲ 收缩压，根据收缩压值查随机数字表，随机分为３ 组：模型组、地龙降压胶囊低剂量组、地龙降压胶囊高剂量组，每组８ 只。地龙降压胶囊干预组，分别以每日地龙降压胶囊低剂

化检测。

１．５．３  指标检测 血浆儿茶酚胺（ＣＡ）、血清肾胺酶（ｒｅｎａｌａｓｅ）水平测定采用酶联免疫吸附法检测，严格按照试剂盒说明进行操作。

１．６  统计学处理

采用ＳＰＳＳ２０．０ 软件进行统计学处理。数据结果符合正态分布以ｘ珚±ｓ 表示，定量资料多组间两两比较采用方差分析 （方差齐的采用 ＬＳＤ 检验，

方差不齐者采用 Ｄｕｎｎｅｔｔ'ｔ检验），以 Ｐ＜０．０５ 为差异有统计学意义。

２ 结 果

２．１  地龙降压胶囊对ＳＨＲ 收缩压的影响

与  ＷＫＹ 组比较，模型组大鼠收缩压随鼠龄增

加逐渐升高（Ｐ＜０．０５）；与模型组相比，随着给药时间的延长，地龙降压胶囊高剂量组给药第４ 周收缩

压下降有统计学差异（Ｐ＜０．０５），地龙降压胶囊低剂量组给药第６ 周收缩压下降有统计学差异  （Ｐ＜ ０．０５）；地龙降压胶囊高、低剂量组之间的差异无统

计学意义（Ｐ＞０．０５）。见表１。

２．２  地龙降压胶囊对ＳＨＲ 血浆儿茶酚胺水平、血

清肾胺酶水平的影响

与  ＷＫＹ 组比较，模型组大鼠血浆儿茶酚胺水

平升高，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；与模型组比较，地龙降压胶囊高、低剂量组大鼠血浆儿茶酚胺

水平均降低（Ｐ＜０．０５）。给药８ 周后，与  ＷＫＹ 组比较，模型组大鼠血清肾胺酶水平降低，差异有统

计学意义（Ｐ＜０．０５）；与模型组比较，各给药组大鼠血清中肾胺酶水平均升高，差异有统计学意义  （Ｐ

＜０．０５）；其中以高剂量组差异显著。见表２。

表２ 地龙降压胶囊对ＳＨＲ 儿茶酚胺和肾胺酶水平的影响

Ｔａｂｌｅ２ ＴｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆＤｉｌｏｎｇａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｃａｐｓｕｌｅｏｎ

量组１２０ ｍｇ／ｋｇ（临床成人用量的等效剂量）、地龙降压胶囊高剂量组２４０ ｍｇ／ｋｇ（临床成人用量等效剂量的２倍）灌胃。模型组给予等体积的蒸馏水灌

ｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅａｎｄｒｅｎａｌａｓｅｉｎＳＨＲ

儿茶酚胺

分组

／（μｇ·Ｌ－１）

ｘ珚±ｓ

肾胺酶

／（μｇ·ｍｌ－１）

胃。另取 ＷＫＹ 雄 性 大 鼠 ８ 只 作 为 正 常 对 照

（ＷＫＹ 组），给予等体积的蒸馏水灌胃。所有大鼠每日灌胃１次，药物干预８周。

１．５  检测指标

１．５．１  一般情况及收缩压监测     分别于连续给药前、给药后第２周、４ 周、６ 周、８ 周测定大鼠动脉血压。动脉血压用智能无创血压计－鼠仪 ＢＰ－９８Ａ，采用尾套法，给每只大鼠连续测量血压５ 次，取平均值作为测量结果。

１．５．２  样品采集及处理      干预 ８ 周实验结束后，夜 间禁食，次 日清晨腹腔注射 １０％ 水合氯醛（３ ｍｌ／ｋｇ）麻 醉，心 脏采血 ４ ｍｌ后 分离血清用于血清学检测；脱 颈椎处死后剖腹摘取完整左侧肾脏用４％ 多聚甲醛固定４８ｈ 后行免疫组

ＷＫＹ 组 ７０．９７±１４．４６   ４．３９±０．３４

模型组 １２４．８４±１７．５１１）   １．７６±０．２９１）地龙降压胶囊高剂量组     ９０．０９±１２．４４２）   ４．３７±０．２５２）地龙降压胶囊低剂量组     ９２．５８±１１．８４２）   ２．９３±０．５９１）２）

与  ＷＫＹ 组比较，１）Ｐ ＜０．０５；与 模型组比较，２）Ｐ ＜

０．０５。

２．３  肾脏肾胺酶的表达

免疫组化显示，ＷＫＹ 组大鼠肾胺酶在近端小管中高度表达，也存在于肾小球和远端小管中（棕黄色颗粒，以下同）。模型组大鼠肾胺酶在近端小管、远端小管、肾小球表达较 ＷＫＹ 组明显减少；地龙降压胶囊各剂量组与模型组比较，肾胺酶表达均有不同程度增加。见图１。

）。模型组大鼠肾胺酶在近端小管、远端小管、肾小球表达较 ＷＫＹ 组明显减少；地龙降压胶囊各剂量组与模型组比较，肾胺酶表达均有不同程度增加。见图１。