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检测试剂盒操作步骤

阅读:2524          发布时间:2012-5-7
提 供 商 上海恒远生物科技有限公司 资料大小 106.5KB
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资料类型 WORD 文档 浏览次数 2524次
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    人白介素12(IL-12)检测试剂盒使用说明书021—60449724

 操作步骤

1.         标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

60 ng/L

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

30 ng/L

4号标准品

150μl5号标准品加入150μl标准品稀释液

15 ng/L

3号标准品

150μl4号标准品加入150μl标准品稀释液

7.5 ng/L

2号标准品

150μl3号标准品加入150μl标准品稀释液

3.75 ng/L

1号标准品

150μl2号标准品加入150μl标准品稀释液

 2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.         温育:用封板膜封板后置37温育30分钟。  

4.         配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.         温育:操作同3

8.         洗涤:操作同5

9.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37

 

 

10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(120ng/L

0.5ml×1

3

酶标包被板

12孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

显色剂B

6ml×1/

12

密封袋

1

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

 

保存条件及有效期

1.试剂盒保存:2-8

2.有效期:6个月

人白介素12(IL-12)试剂盒适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;详情请至电!

 

 

避光显色15分钟.

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