ELISA实验中为了确定*信号和zui低背景应将捕获抗体和检测抗体在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时，应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
    标准品的配制：对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。
    一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。为了优化灵敏度，建议放置一个晚上孵育标准品和标本。若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。当测定混合液体中的抗原时，如血清，建议在标本稀释液中加不相干的Ig。
1. 仔细阅读说明书；
2. 确定试剂盒在有效期内；
3. 按说明书确定所有试剂齐全（数量、体积）；
4. 标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份；
5. 注意低温保存；
6. 准备好所有实验额外所需物品；
7. 根据检测标本数量确定所需试剂的量；
8. 按说明书将所用试剂平衡至室温，配制所需试剂。
    在一般的概念里，ELISA技术的可操作性强，不需复杂设备，甚至*手工加样、洗板和肉眼判读结果，便可完成该技术的操作。随着人们对质量控制意识的加强，尽可能做到zui低限度的减少系统误差，以及减少劳动强度等观念的不断改进，解决ELISA技术中加样、温育、洗板及判读结果过程的系统误差问题及率运作问题导致了自动化概念的形成。ELISA技术的加样、温育、洗板及判读结果过程的科学地、有机地、系统地结合，尽可能地减少各环节的人为因素的影响，便成为自动化ELISA技术的理论基础。