1、温度：一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃，温度过高或过低都会影响到细胞的生长。

2、渗透压：细胞在高渗透溶液中低渗溶液中，可以立即发生皱缩或肿胀、破裂。所以，渗透压是体外细胞培养的重要条件之一。

3、气体环境和PH值：体外培植细胞需要理想的气体环境，氧和二氧化碳石细胞生存必需的条件之一。

4、无毒和无菌：无毒和无菌是体外培养细胞的首要环境条件。

5、辐射线和超声波 
    ① 可见光：波长是390~780nm。可见光的各种有色光能引起细胞退变，延长核分裂的间期，还可显著降低细胞的附壁能力。因此，体外培养细胞应避免日光直接照射，在黑暗中进行培养或短期存放。
    ② 紫外线：弱紫外线下耐受能力强的细胞变化不大，但对敏感的细胞有损害。
    ③ 放射线：X射线对细胞有明显损伤，B射线可影响细胞核的分裂，R射线使核分裂数减少并出现不正常的核分裂，可使细胞死亡。

4、超声波
    在超声波振动下，细胞很快会破裂，开始是胞质发生紊乱的流动，原生质胶体结构也有明显变化，若停止超声波振动可恢复。细胞致死的原因是由于产生空化作用所致，当超声波在2.5W/c㎡时，细胞受损，染色体发生畸变，首先发生畸变的是核染色体。

6、细胞接种密度
    在体外培养细胞中，细胞接种数对细胞的生长有影响，适宜的接种密度，可以促使细胞增殖，接种密度太低或太高都不利于细胞的生长增殖。

7、容器转动速度和悬浮搅动速度
    有时为了研究的需要而将培养细胞在容器中进行旋转或搅动，如贴壁细胞在旋转管中培养，使转鼓的转速提高，细胞增殖率随之提高。其原因可能是转动使足够的营养物质流动和较充分的氧化作用之故。