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技术指导抗原的修复办法
阅读:1481 发布时间:2013-7-18上海恒远生物长期的抗原实验中,我们经常利用柠檬酸钠法,蛋白酶K法
尿素法三类方法对抗原进行修复,实验效果都不错,以下就针对此方法做出的详细说明,欢迎参考。你对实验有任何疑问均可我司技术,我们为在我司购买产品的所有客户均提供可靠的售前售后的技术指导,本司elisa试剂盒提供免费代测服务,欢迎:
一、柠檬酸钠法
1. 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠(pH6.0)的容器中。
2. 微波中高火6-8min。
3. 室温冷却。
4. 用PBS洗涤3次,每次5min。
二、蛋白酶K法
1. 配制新鲜溶液:
25μl 20mg/ml蛋白酶K;
2.5ml 1MTris-HCl(pH8.0);
0.5ml 0.5M EDTA(pH8.0);
加水定容到50ml。
2. 37℃下,将玻片放在架子上孵育5min(蛋白酶K不要预热)。
3. 用PBS洗涤3次,每次5min。
三、尿素法
1. 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml 的1M尿素(新鲜配制)的容器中。
2. 微波10min,20min或者30min,每5min补充一次蒸发掉的水。
3. 冷却30min到1h。
4. 用蒸馏水洗涤4次,每次3min,再用PBS洗涤3min。
我司提供的柠檬酸钠,蛋白酶,尿素等科研试剂,7月*活动正在进行中,详情请登录查询。
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一、柠檬酸钠法
1. 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠(pH6.0)的容器中。
2. 微波中高火6-8min。
3. 室温冷却。
4. 用PBS洗涤3次,每次5min。
二、蛋白酶K法
1. 配制新鲜溶液:
25μl 20mg/ml蛋白酶K;
2.5ml 1MTris-HCl(pH8.0);
0.5ml 0.5M EDTA(pH8.0);
加水定容到50ml。
2. 37℃下,将玻片放在架子上孵育5min(蛋白酶K不要预热)。
3. 用PBS洗涤3次,每次5min。
三、尿素法
1. 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml 的1M尿素(新鲜配制)的容器中。
2. 微波10min,20min或者30min,每5min补充一次蒸发掉的水。
3. 冷却30min到1h。
4. 用蒸馏水洗涤4次,每次3min,再用PBS洗涤3min。
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