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ELISA实验加样防错小经验跟常见问题解决
阅读:2182 发布时间:2014-6-11ELISA加样时的防错小经验:
(1)用一张写满字的纸,字越多越好,比如报纸,垫在下面,这样,加过标本的小孔看过去下面的字会变小,没加的字正常,非常容易区分。
(2)可以利用液面反光与没有加的孔加以区别
(3)在标本加完后,再把加样枪全压下,使液面产生小气泡,也可以加以区分
实验zui常见问题解答:
问:做间接Elisa法测试小鼠血清中的IgE抗体,设空白对照、和阴性对照、阳性血清稀释倍数为5千、1万、10万、20万不等,用的是生物素标记的羊抗鼠IgE抗体,和亲和素的辣根过氧化物酶。可是结果除了空白对照孔没有颜色外,其余各孔全有颜色,而且OD值都相差不大,为什么?
回答:可能原因如下:
(1) 水质被金属离子等污染;防止办法尽量使用新鲜水或蒸馏水。
(2) 洗涤不充分,样品中其它成分残留或酶残留;防止办法洗涤液应注满微孔,充分洗涤。
(3) 移液头重复使用,未洗净或消毒不*; 防止办法移液头一次性使用。
(4) 酶标板灵敏度过高。
(5) 一抗显色时间的控制等等,关于ELISA的每一步都要注意才行。
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96T 检测84个样本,12孔用于绘制标准曲线
48T 检测42个样本,6孔用于绘制标准曲线
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