恒远生物告诉您elisa常见问题的解决方法

       elisa实验中难免碰见一些大大小小的问题，就是这些常见的问题却会让人产生心理矛盾，百思不得其解，其实呢要想知道解决的方法就一定要先把问题的原因给弄明白，知道了问题的原因再去寻找问题的解决方法。您在elisa实验中遇见了不明白的问题了吗？您找到问题的原因了吗？如果还没有找到问题的原因，就请您仔细阅读这篇文章吧，通过我们公司的技术工作人员们多年的研究与整合，表明得出了以下的几个结论有方案。

      *个呢就是选择试剂 选择质量优良的检测试剂，一定要严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。

      第二个就是加样 可能出现的原因有三个，*个原因可能是血清或血浆标本分离不好即进行加样； 第二原因可能是手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长（特别是室内温度较高时）；这第三个原因就可能是加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。这是几个原因，那么解决方法是什么呢？您还先别着急，这解决办法就有五个， 第1、 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。第2、 加样后及时放入孵箱。 第3、 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。第4、如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 第5、 标本较多时，请分批操作。

      这第三个呢就是孵育可能原因的原因了，孵育可能是因为在孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；当然也可能是因为孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。原因出现了，我们自然有解决的方法啦，解决办法就是贴封片或加盖； 还有要按说明步骤严格控制操作时间。

       还有您不懂得原因问题？别着急，还有呢！第四个就是洗板可能原因， *个是 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 第二个是采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。其三呢 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法就是要保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；还有要合理安排，或多用几台洗板机。

      第五个显色的原因可能是显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；还可能 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法呢就是显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用；还有加样时保持显色剂不外流；zui后呢要记住 A、B液应避免接触金属器械。

      终止可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。

       zui后一个就是读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
  

       常见的几个问题已经为您解说完了，您仔细的阅读之后一定明白了不少问题吧！我们再来做一个总结，其实呢在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。

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                                                                                                                 2013-9-25