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大鼠胰岛素细胞传代方法
阅读:1386 发布时间:2013-6-17大鼠胰岛素细胞传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml*培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代;2~3天1次。
。
(二)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
细胞来源于美国ScienCell实验室、美国ATCC细胞库,所有细胞均为原代细胞,非细胞系。细胞经过严格的控制(从组织来源、实验室条件等方面),纯度可达98%。不同的细胞传代次数不一。多数细胞种类是从胚胎提取,于原代(或二代)冻存在液氮中。大鼠胰岛素细胞采用干冰运输,客户收到细胞后,从干冰中取出放入液氮中保存,待实验安排好后,解冻后即可以进行复苏培养。美国ATCC细胞库、ScienCell实验室的细胞、培养基都是经过严格检验,分离、配制而成,产品质量过硬。
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