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恒远生物|人羊膜细胞(WISH)培养建议

阅读:361          发布时间:2023-5-24

品牌: 恒远生物

货号: HYCC10347

中文名称: 人羊膜细胞;WISH

规格: T25

形态特性: 上皮细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 最初以为这株细胞的起源是正常羊膜,但随后通过同工酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹法分析,证实该细胞是HeLa细胞污染的;角蛋白阳性。

培养条件: DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS 

传代方法: 1:2~1:4传代,每周2~3次。

冻存条件: 无血清细胞冻存液


一、细胞培养常见问题解答


1.培养基为什么一般都是偏红色?

因为培养基加了酚红来显示颜色,指示pH范围为6-8,颜色会由黄变为紫红。这是为了我们能更直观观察培养液的变化,如变黄,则代表偏酸,偏碱性了就显示偏紫色。一般来说,细胞吸收营养后,变黄后就暗示我们要换培养基啦!所以密切观察很重要哦!


2.细胞的居住环境

舒适无菌的环境是细胞健康生活的重要基础。如下图为培养细胞的器皿,包括形状、规格、用途多样的培养瓶、培养皿及培养板。最终住进37℃,5%CO2的恒温培养箱。


3.细胞培养皿和培养瓶区别?

就细胞培养状态来说,培养瓶和培养皿没有太大区别,主要在于安全系数(培养瓶>培养皿)、培养细胞数量(大培养瓶>培养皿)。但是培养瓶成本也会相对较高,因此无特殊要求,一般选择培养皿即可。


4.为什么细胞复苏后,很多难以贴壁?

忽略培养基的问题,主要考虑细胞冻存时状态差或者复苏时动作太慢导致细胞死亡。切记最重要的融化速度要快,可不时摇动冷冻管,使之尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。


5.细胞冻存时对细胞量有要求吗?

细胞复苏时会有一定的细胞死亡,因此细胞的浓度应足够高,起始浓度106—107个/ml/管。


6.细胞污染怎么办?

如发现细胞有污染,一般建议丢弃。如果细胞非常宝贵,可试着加入含抗生素的培养基反复清洗,并用抗生素含量高的培养基培养,并经常更换培养基。


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