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横纹肌肉瘤细胞
在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞的相关产品如下:
A-204 横纹肌肉瘤细胞
L1210 小鼠淋巴细胞白血病
RBL-1 大鼠嗜碱性粒细胞白血病
MV-1-Lu 鼬肺上皮细胞
NIH3T3 小鼠胚胎成纤维细胞
293 人胚肾细胞
L929 小鼠成纤维细胞
293T 人胚肾T细胞
HSC-T6 大鼠肝星状细胞
GES-1 人胃粘膜细胞
L-02 人肝细胞
初学者易犯错误:
1 水浴锅未预热或者未预热到 37℃。
2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。
3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。
4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。
细胞计数实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
准备工作:取一瓶传代的细胞,按照《传代细胞培养(消化法)》中的传代方法繁殖细胞,待 长成单层后以被使用。
细胞悬液制备:细胞悬液的制备方法是用 0.25%的胰蛋白酶液消化、PBS液洗涤后,加入培养液(或 Hanks 液或 PBS等平衡盐溶液),吹打制成待测细胞悬液。
公司其他生物培养基产品有:
缓冲MUG琼脂 Buffered MUG Agar 用于滤膜MUG法检测食品中大肠杆菌数(SN/T1059.2)
乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂 用于滤膜MUG法检测食品中大肠菌群数(SN/T1059.2)
茜素-β-半乳糖苷琼脂 Aliz-gal Agar 用于食品、饮料和饮用水中大肠菌群快速检测和计数(GB/T)
Tergitol-7 琼脂 Tergitol-7 Agar 用于大肠菌群的鉴定(NMKL)
TTC 溶液(0.125%) TTC Solution(0.125%) 添加于HB0127中
标准I号营养琼脂 Standard II Nutrient Agar 标准细菌计数、含糖(MERCK方法)
标准II号营养琼脂 Standard II Nutrient Agar 细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用(MERCK方法)
A1 培养基 A1 Medium 用于检测水中的大肠菌群(US-EPA标准)
哥伦比亚CNA琼脂基础 Columbia CAN Agar Base 用于分离革兰氏阳性球菌(Acumedia方法)
m-FC 琼脂 m-FC Agar 用于大肠菌群的滤膜法检测(MERCK方法)
细胞计数:
1.盖好盖玻片:取一套血球计数板,将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。
2.制备计数用的细胞悬液:用吸管吸 5滴细胞悬液到一离心管中,加入 5滴台盼蓝染
液(0.4%)或苯胺黑,活细胞不会被染色,加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞。
3.将细胞悬液滴入计数板:将待测细胞悬液吹均匀,然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入,要保证盖片下充满悬液,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
4.统计四个大格的细胞数:将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察,并移动计数板,当看到镜中出现计数方格后,数出四角的四个大铬(每个大格含有 16 个中铬)中没有被染液染上色的细胞数目。
5.计算原细胞悬液的细胞数:按照下面公式计算细胞密度:(细胞悬液的细胞数)/ml= ( 四个大格子细胞数/4) ×2×104
说明:公式中除以4 因为计数了4 个大格的细胞数。公式中乘以2因为细胞悬液于染液是 1:1 稀释。公式中乘以 104 因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
A-204
MEL 小鼠红白血病细胞
MFC 小鼠前胃癌细胞
MMQ 大鼠垂体瘤细胞
NG108-15 小鼠神经细胞瘤/大鼠神经胶质细胞瘤杂交瘤细胞
P19 小鼠畸胎瘤细胞
PC-12 大鼠嗜铬细胞瘤细胞
RAW264.7 小鼠巨噬细胞瘤
SP2/0-AG14 小鼠骨髓瘤
Yac-1 小鼠淋巴瘤细胞
H-4-II-E 大鼠肝细胞瘤
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