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Ca Ski(人小肠颈部表皮样癌细胞)
实验前准备:
1.将水浴锅预热至 37℃
2.用 75%酒精擦拭紫外线照射 30min的超净工作台台面。
3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。
取出冻存管:根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。
迅速解冻:迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化。约 1-2min后冻存管内液体*溶解,取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁,再拿入超净台内。
平衡离心:用架盘天平平衡后,放入离心机中3000r/min 离心 3min
在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞的相关产品如下:
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SH-SY5Y 人骨髓神经母细胞瘤
SK-BR-3 人乳腺癌细胞
SK-MEL-1 人皮肤黑色素瘤细胞
SK-N-SH 人神经母细胞瘤
SK-OV-3 人卵巢腺瘤细胞
SMMC-7721 人肝癌细胞
SW13 人肾上腺皮质瘤
SW480 人结直肠癌
T84 人结肠癌细胞
THP1 人单核细胞型淋巴瘤
制备细胞悬液:
1.吸弃上清液。
2.向离心管内加入 10ml 培养液,吹打制成细胞悬液。
细胞计数:细胞浓度以 5×105/ml 为宜。
培养细胞 :将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内 ,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者 24-48 小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。
公司其他生物培养基产品有:
叠氮钠葡萄糖肉汤 Azide Dextrose Broth 用于链球菌的增菌培养
乙基紫叠氮钠肉汤 Ethyl Violet Azide Broth 用于链球菌的增菌培养
KF链球菌琼脂 KF Streptococcus Agar 用于链球菌的选择性分离及计数(SN标准)
LIM培养基 LIM Medium 用于链球菌的分离培养(Japan方法)
BETA-SSA 琼脂 BETA-SSA Agar 用于链球菌的选择性分离培养(ACUMEDIA方法)
小肠结肠炎耶尔森氏菌
改良Y培养基 Agar Y,Modified 用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌 (GB标准)
改良磷酸盐缓冲液PSB Phosphate Saline Buffer,Modified 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌冷增菌培养 (GB标准)
ITC 肉汤 ITC Broth 用于分离培养耶尔森氏菌(ISO方法)
CIN-1I培养基基础 Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌 (GB标准)
初学者易犯错误:
1 水浴锅未预热或者未预热到 37℃。
2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。
3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。
4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。
细胞计数实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
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NCI-H446 人小细胞肺癌
NTERA-2 人恶性多发性畸胎瘤细胞
PA-1 人卵巢畸胎瘤细胞
PANC-1 人胰腺癌细胞
PC-3 人前列腺癌细胞
RAJI 黑人Burkitt淋巴瘤
RAMOS(RA.1) 人B淋巴细胞瘤
RPMI-8226 人多发骨髓瘤细胞
SaOS-2 人骨肉瘤细胞
SF767 人脑瘤
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