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细胞名称 鼠B淋巴瘤细胞;MR1
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞由华中科技大学生命科学学院苏莉教授提交保藏,可用于相关的基础研究。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C6
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
产品图片:
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF
520-36-5 芹菜素标准品 Apigenin 30mg
578-74-5 芹菜苷元-7-葡萄糖标准品 Apigenin-7-glucoside 30mg
41372-20-7 盐酸阿扑吗啡标准品 Apomorphine Hydrochloride 250mg
73218-79-8 盐酸阿可乐定标准品 Apraclonidine Hydrochloride 100mg
阿瑞吡坦对照品标准品 Aprepitant 50mg
阿瑞吡坦相关化合物A标准品 10mg
7643-75-6 L-阿拉伯糖醇标准品 L-Arabinitol 500mg
74-79-3 L-精氨酸标准品 L-Arginine 200mg
1119-34-2 盐酸精氨酸标准品 Arginine Hydrochloride 125mg
阿立哌唑标准品 200mg
阿立哌唑杂质C标准品 ea
阿立哌唑杂质B标准品 ea
阿立哌唑相关物质F标准品 25mg
阿立哌唑相关物质G标准品 25mg
98-50-0 阿散酸标准品 Arsanilic Acid 25mg
阿立哌唑相关物质H标准品 25mg
71963-77-4 蒿甲醚标准品 Artemether 100mg
71939-50-9 蒿甲醚相关物质A标准品 Artemether Related Compound A 15mg
88495-63-0 蒿甲醚相关物质B标准品 15mg
88495-63-0 青蒿琥酯标准品 Artesunate 200mg
23964-58-1 阿替卡因标准品 Articaine 40mg
23964-57-0 盐酸阿替卡因标准品 Articaine Hydrochloride 125mg
阿替卡因相关物质A标准品 Articaine Related Compound A 40mg
阿替卡因相关物质E标准品 Articaine Related Compound E 40mg
50-81-7 维生素C标准品 Ascorbic Acid (Vitamin C) 1g
137-66-6 维生素C棕榈酸酯标准品 Ascorbyl P
MMP-3 人血清金属基质蛋白酶-3
MMP-7 人血清金属基质蛋白酶-7
MMP-8 人血清金属基质蛋白酶-8
Beta1-AR(human) 抗β1肾上腺素能受体自身抗体(人)
MMP-9 人血清金属基质蛋白酶-9
TIMP-1 人金属蛋白酶组织抑制因子1
TIMP-2 人金属蛋白酶组织抑制因子2
CD34(Human) 人CD34
MSP 人巨噬细胞刺激因子
TLR4(human) 人Toll样受体4
TLR2(human) 人Toll样受体2
Inhibin 人抑制素
Human t-PA/ELISA 人组织型纤溶酶原激活剂
Humen PAI-1/ELISA 人凝血酶原激活抑制物ELISA试剂盒
Cardiotrophin 人心营养素-1
STM 人可溶性血栓调节蛋白
HSP-60 Human 人热休克蛋白-60
SOD(Human Super Oxidase Dimutase) 人超氧化物歧化酶
IGF-BP3 人胰岛素样生长因子BP3
Human Urotensin II 人尾加压素II
鼠B淋巴瘤细胞;MR1TSLP(human) 人胸腺基质淋巴细胞生成素
PLGH 人胎盘生长素
FN 人纤维连结蛋白
YKL-40/CGP-39 human 软骨糖
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。
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