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细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;ID7
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生单克隆抗体。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C30
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
产品图片:
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF
白(CETP)ELISA试剂盒 人组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human Caveolin-1,Cav-1 ELISA Kit 大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒 人窖蛋白(Cav-1)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα ELISA Kit 大鼠c-fos ELISA试剂盒 人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human CCAAT/enhancer binding protein deta,C/EBPδ ELISA Kit 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA试剂盒 人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon,C/EBPε ELISA Kit 大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒 人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human CC-chemokine receptor 1,CCR1 ELISA Kit 大鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒 人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human cecropin B,CecB ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒 人杀菌肽B(CecB)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human cellular fibronectin,cFn ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒 人细胞纤维连接蛋白(cFn)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human Centromere Protein,CENP-B ELISA Kit 大鼠肉毒碱脂酰转移酶(CACT)ELISA试剂盒 人着丝粒蛋白B(CENP-B)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human Ceruloplasmin,CP/CER ELISA Kit 大鼠心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒 人铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human c-fos ELISA Kit 大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒 人c-fos ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit 大鼠心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)ELISA试剂盒 人伴侣蛋白10(CPN10)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human chemerin ELISA Kit 大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 人chemerin ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human Chlamydia pneumoniae antibody,Cpn-Ab ELISA Kit 大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒 人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human Chlamydia trachomatis,CT ELISA Kit 大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA试剂盒 人沙眼衣原体抗体(CT)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human Chlamydia trachomatis,CT ELISA Kit 大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒 人沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human chlamydial protease-like activity factor,CPAF ELISA Kit 大鼠钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒 人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISA Kit 大鼠钙调素(CAM)ELISA试剂盒 人胆囊小鼠杂交瘤细胞;ID7收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human cholecystokinin,CCK ELISA Kit 大鼠牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒 人胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T
Human cholesterol,CH ELISA Kit 大鼠钙/钙调素依赖性蛋
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。
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