猫肾细胞；CRFK 返回列表页

细胞名称 猫肾细胞；CRFK

形态特性 上皮细胞样

生长特性 贴壁生长

特征特性 此细胞不含牛病毒性痢疾(BVD)病毒。

培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 新生牛血清，10%

传代方法 1：2~1：8

传代情况 P188

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 培养法（-）

STR

同工酶

染色体

产品图片：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉汤基础 规格:  100g 作用：  用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格:  250g 作用：  用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格:  250g 作用：  加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格:  250g 作用：  可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格:  2x5支 作用：  试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF

id 200mg

73-31-4 褪黑素标准品 Melatonin 100mg

盐酸美金刚杂质A标准品 50mg

盐酸美金刚杂质B标准品 15mg

盐酸美金刚杂质C标准品 50mg

58-27-5 维生素K3标准品 Menadione (Vitamin K3) 200mg

鲱鱼油标准品 2ml

2216-51-5 薄荷醇标准品 Menthol 250mg

134-09-8 邻氨基甲酯标准品 Menthyl Anthranilate 500mg

76-90-4 溴化甲哌佐酯标准品 Mepenzolate Bromide 200mg

1950-12-4 美芬妥因标准品 Mephenytoin 250mg

115-38-8 甲苯比妥标准品 Mephobarbital CIV 250mg

1722-62-9 盐酸甲哌卡因标准品 Mepivacaine Hydrochloride 200mg

1247-42-3 甲泼尼松标准品 Meprednisone 200mg

57-53-4 甲丙氨酯标准品 Meprobamate CIV 200mg

956-03-6 盐酸美普卡因标准品 Meprylcaine Hydrochloride 200mg

" 

3-巯基-2-甲丙酸1.2-二苯乙胺盐标准品 

" 75mg

6112-76-1 巯基嘌呤标准品 Mercaptopurine 500mg

119478-56-7 美罗培南标准品 Meropenem 300mg

89-57-6 美沙拉嗪标准品 Mesalamine 200mg

美司那相关物质A标准品 50mg

美司那相关物质B标准品 50mg

32672-69-8 苯磺酸美索达嗪标准品 Mesoridazine Besylate 250mg

72-33-3 炔雌醇甲醚标准品 Mestranol 200mg

间甲酚 1ml

1115-70-4 盐酸二甲双胍标准品 Metformin Hydrochloride 200mg

461-58-5 盐酸二甲双胍相关物质A标准品 30mg

1396331 盐酸二甲双胍相关物质B标准品

ensin 2/BD-2(mouse) /FITC  荧光素标记防御素β2抗体IgG

Anti-Defensin Beta1/FITC  荧光素标记防御素β1抗体IgG

Anti-Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat) /FITC  荧光素标记 防御素β2抗体（大鼠）IgG

Anti-Defensin alpha1,2,3/FITC  荧光素标记抗防御素α1,α2,α3抗体IgG

Anti-Defensin alpha 4 /FITC  荧光素标记防御素α4抗体IgG

Anti-DEK oncogene /FITC  荧光素标记DEK癌基因结合蛋白IgG

Anti-Deltex-1/FITC  荧光素标记Deltex-1抗体IgG

Anti-Desmin/FITC  荧光素标记结蛋白抗体IgG

Anti-DHAV/FITC  鸭甲型肝炎A病毒抗体IgG

Anti-DIO2/FITC  荧光素标记脱酶2抗体IgG

Anti-DISC1(CT)/FITC  荧光素标记DISC1 C端抗体IgG

Anti-DISC1(NT)/FITC  荧光素标记DISC1 N端抗体IgG

Anti-DJ-1/FITC  荧光素标记丝裂原依赖性癌基因蛋白抗体IgG

Anti-DKK1/FITC  荧光素标记抑癌蛋白DKK1抗体IgG

Anti-DKK3/FITC  荧光素标记抑癌蛋白DKK3抗体IgG

Anti-KMT6/EZH2/FITC  荧光素标记抑癌蛋白EZH2抗体IgG

Anti-DLK1/FITC  荧光素标记穿膜蛋白DLK1抗体IgG

Anti-DLX4/FITC  荧光素标记兔抗DLX4抗体IgG

Anti-DMBT1 /FITC  荧光素标记抑癌基因抗体IgG

Anti-DMT1/FITC  荧光素标记金属离子转运体1抗体IgG

Anti-Dnmt1/FITC  荧光素标记DNA甲基转移酶1抗体IgG

猫肾细胞；CRFKAnti-Dnmt3a/FITC  荧光素标记DNA甲基转移酶-3α抗体IgG

Anti-Dnmt3 Beta/FITC  荧光素标记DNA甲基转移酶-3β抗体IgG

Anti-DNA-PKcs/FITC  荧光素标记DNA依赖蛋白激酶催化亚基抗体IgG

Anti-Dok-1/FITC  荧光素标记酪氨酸激酶衰减蛋

操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。