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单克隆抗体技术

时间:2011-4-25阅读:829
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一、单克隆抗体的产生
1. 动物体内诱生方法:目前McAb治疗用或体外诊断用的多数尚采用这一方法制备。先在小鼠腹腔注射液体石蜡或福氏不*佐剂,一周后将杂交瘤细胞悬液注射腹腔,1~2周后,无菌抽取腹水,离心取上清液即可。
2.体外培养法:这是实验室制备的方法。将杂交瘤细胞置培养瓶中培养,待培养液颜色改变或细胞过多开始死亡时,收集上清液,离心去掉碎片及细胞即可。另一种是杂交瘤细胞高密度培养法。
二、单克隆抗体的纯化及鉴定
目前常用的纯化方法有盐析、凝胶过滤、离子交换层析和辛酸提取等方法。
单克隆抗体性质鉴定方法如放免测定、补体介导溶血试验、ELISA、免疫酶、玫瑰花结形成试验等,zui常用的为ELISA方法,一般先作定性试验,如阳性,进一步作定量检测。
 

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