柱式血液DNAout

柱式血液DNAout
产品及特点
本产品是基于离心柱/硅胶膜原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物（包括人
和禽类）抗凝全血中提取基因组DNA的试剂。它具有下列特点：
1. DNA纯净，OD260/280在1.8-2.0之间。不含蛋白质和RNA污染，可直
接用于PCR、酶切、杂交等。
2. 产量高，一般为1-10 ug/mL全血（对哺乳动物血液）。
3. 操作简单，整个过程约20分钟，全室温操作，适合大规模样品处理。
4. 用量广泛， 每次可以处理少达20 uL（对禽类动物血液）， 多达1 mL的血
液（对哺乳动物血液）。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分
成 份
50次包装
（60306-50）
溶液A 25mL
溶液B 25 mL
离心吸附柱 50套
通用洗柱液 50mL
通用洗脱液 5 mL
使用手册 1份

运输及保存 常温运输、4℃保存，有效期一年
自备试剂 无
使用方法
1. 在0.02-1 mL新鲜或抗凝血液（冷冻血需先37℃水浴融化）中加入0.5 mL
溶液A，吹打混匀。
a） 哺乳动物，血液使用量以300 uL以下为宜，使用量越大产量越高，但
产率会降低。如果血液多于300 uL，重复1-2步两次可以提高产率。
b） 禽类动物，血液使用量以20 uL以下为宜，可以从第3步做起。
2. 室温12,000-15,000 rpm离心2分钟，沉淀呈粉红色，小心倾去上清。
3. 再短暂离心半分钟，吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解，但一般
可以省略。
4. 向有沉淀的离心管内加入0.5 mL溶液B（溶液B有少量晶体沉淀，用前需
要摇晃均匀），用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。此步目的是裂解细胞，释
放DNA，所以吹打越充分越好。
5. 静置2分钟待溶液变清亮后，将液体转移到离心吸附柱中并静置2-5分钟，
以使DNA与膜充分结合。
6. 12,000 rpm离心半分钟，DNA将吸附到膜上，弃收集管中的废液。
7. 加入0.7 mL的通用洗柱液，12,000 rpm离心半分钟，弃收集管中的废液。
8. 加入0.3 mL的通用洗柱液，12,000 rpm离心半分钟，弃收集管中的废液。
9. 12,000 rpm离心半分钟，甩干残留液体。此步很重要，以去除膜上残留通
用洗柱液，否则会影响后续反应。
10. 将离心吸附柱置于一新的1.5 mL塑料离心管（自备）中，加入适量50 uL
通用洗脱液，室温放置2分钟。如果将通用洗脱液在65℃预热后再使用，洗
脱DNA的效果会更好。
11. 12,000 rpm离心半分钟，离心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或放
冰箱长期保存。