1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
ALDH3A1乙醛脱氢酶家族3成员A1抗体
phospho-alpha B Crystallin (Ser59)磷酸化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体
ACTG2γ2肌动蛋白抗体
AESgp130结合蛋白GAM抗体
AMHR2缪勒激素2型受体抗体
ACTR1激活素受体1A抗体
ACTR2激活素受体2A抗体
Activin Receptor Type IIB激活素受体2B抗体
C2orf88 2号染色体开放阅读框88抗体
ARHGEF18G蛋白偶联受体ARHGEF18抗体
Activin A Receptor Type IB激活素受体1B抗体
ARA24雄激素受体相关蛋白24抗体
Amyloid Precursor Protein淀粉样肽前体蛋白抗体(C端)
ADCY2腺苷酸环化酶2抗体
APOC3载脂蛋白C3抗体
Apolipoprotein E4载脂蛋白E4抗体
AMBRA1自噬相关基因AMBRA1抗体
Phospho-ATG4C(Ser177)磷酸化自噬相关蛋白4C抗体
Phospho-ATG4C(Ser398)磷酸化自噬相关蛋白4C抗体
phospho-ASK1 (Ser966)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-ATXN1 (Ser775)磷酸化失调症蛋白1抗体
ATXN1/Ataxin-1脊髓小脑失调症蛋白1抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr668)磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-ASK1 (Ser967)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-ASK1 (Thr845)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-ATF2 (Thr69/71)磷酸化活化复制因子2抗体
Phospho-ATP1A1 (Tyr10)磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体
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