小鼠ELISA试剂盒试验中洗液使用原则与洗涤方式

洗涤在小鼠ELISA试剂盒过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败。ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。
Elisa试剂盒洗涤液使用原则
1.某一项目的洗液建议使用该试剂盒内的洗液； 
2.同一elisa试剂盒洗液用完了，建议采用同一批号的洗液； 
3.同一批号的洗液也用完了，建议采用同一项目的试剂洗液； 
4.同一项目的洗液用完了，建议使用该项目其他的洗液； 
5.同一项目所有都用完了，建议采用同一系列项目的洗液（比如甲乙丙丁戊庚肝抗体检测，属于肝炎系列，急用时可以暂时混用）； 
6.不建议国产洗液与进口洗液混用，也更不建议不同系列项目的洗液混用，这两点都是因为洗液的配置成分不同，特别是不同项目的洗液（正规试剂），主要组分都不太一样。 
虽然对强阳性标本影响不是很大，但对于临界阳性阴性（灰区）标本影响较大，所以不提倡不同系列项目洗液混用。
ELISA试剂盒洗涤方式
（1）浸泡式 
a.吸干或甩干孔内反应液；
b.用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去）；
c.浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1-2分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短；
d.吸干孔内液体。吸干应*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；
e.重复操作c和d，洗涤3-4次（或按说明规定）。在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
（2）流水冲洗式 
小鼠ELISA试剂盒流水冲洗法zui初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗2分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果更为*，且也简便、快速。已有实验表明，流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳。 
在ELISA操作中，洗涤是zui主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格按要求洗涤，不得马虎。
Multi-class antibodies    Anti-PLASTIN3/T Plastin  丝束蛋白T Plastin抗体    规格：     0.2ml
Multi-class antibodies    Anti-PLC beta 3/Phospholipase C beta 3  磷酯酶Cβ3抗体    规格：     0.2ml
Multi-class antibodies    Anti-Phospho-PLC beta3 (Ser537)  磷酸化磷酯酶Cβ3抗体    规格：     0.1ml
Multi-class antibodies    Anti-Phospho-PLC beta3 (Ser1105)  磷酸化磷酯酶Cβ3抗体    规格：     0.1ml
Multi-class antibodies    Anti-PKC beta 1/2  蛋白激酶C beta 1/2抗体    规格：     0.1ml
Multi-class antibodies    Anti-phospho-PKC (Thr500)  磷酸化蛋白激酶C(T500)抗体    规格：     0.2ml
Multi-class antibodies    Anti-phospho-PKC beta 1/2(Thr500)  磷酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗体    规格：     0.1ml
Multi-class antibodies    Anti-Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641)  磷酸化蛋白激酶C α/β2抗体    规格：     0.1ml
Multi-class antibodies    Anti-PKC alpha  蛋白激酶C α抗体    规格：     0.2ml
小鼠ELISA试剂盒