质体DNA 酵解反应的方法步骤

方法步骤：
1） 取两支1.5 mL微离心管，分别标示为 #1 与 #2 的后，依下表所顺序，
逐一加入酵解反应所需各项物质 （体积单位为 μL）。注意：应等所有成份加的后，再加入限制酶。

2） 以手指头轻弹微离心管，以均匀混合管中各项物质。ELISA试剂盒

3） 离心数秒后，放置于37℃恒温水槽作用1~2 h。

4） 请用这一段时间参照『基本操作技术』所描述的步骤准备一片1.2%洋菜胶体。
 Ethidium bromide 是强致癌物质，严禁戴着手套到处摸！

5） 自恒温水槽取出微离心管，离心数秒后暂存冰中备用。

6） 拟进电泳分析时，请拿出3 支1.5 mL 微离心管，分别标示为 #1, #2与 #3，并依下表所示在各离心管逐一加入适的DNA 与10×追踪染剂（体积单位为 μL）。

7） 把胶片移至电泳槽，注入适电泳缓冲液，以微移液器P20 逐一将样本
吸入注出数次使混合均匀，并小心注入胶片的样本槽中。ELISA试剂盒

8） 接好电极线以定电压100 V 进电泳，待追踪染剂移动至胶体三分的二处时，关闭电源，将胶体移至UV transilluminator box，以拍得相机拍照 。

 DNA泳动方向为 （-） 向 （+）。 此外，在UV transilluminator box上直接观察DNA色带时，没戴眼镜的同学应戴上护目镜或面罩，ELISA试剂盒以避免UV灼伤；含有ethidium bromide的洋菜胶体请丢至容器中！