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免疫组化染色操作步骤-上海信帆生物
2016-6-29 阅读(1510)
免疫组化染色
S—P免疫组化染色试剂盒采用生物素标记的第二抗体与链霉菌抗生物素蛋白连接的过氧化物酶及底物色素混合液来测定细胞和组织中的抗原。
S—P免疫组化染色步骤：
1) 石蜡切片脱蜡和水化后，用PBS(pH7．4)冲洗三次，每次3分钟(3×3’)。
2) 根据每一种抗体的要求，对组织抗原进行相应的修复。
3) 每张切片加1滴或50ul过氧化酶阻断溶液(试剂A)，以阻断内源性过氧化物酶的活性，室温下孵育10分钟。
4) PBS冲洗3×3’。
5) 甩去PBS液，每张切片加1滴或50ul的非免疫性动物血清(试剂B)，室温下孵育10分钟。
6) 甩去血清，每张切片加1滴或50ul的*抗体(用户自选)，室温下孵育60分钟或4℃过夜，建议参阅每种抗体的说明书。
7) PBS冲洗3×5’。
8) 甩去PBS液，每张切片加1滴或50ul生物素标记的第二抗体（试剂C），室温下孵育10分钟。
9) PBS冲洗3×3’。
10)甩去PBS液，每张切片加1滴或50ul链霉菌抗生物素-过氧化物酶溶液(试剂D)，室温下孵育10分钟。
11)PBS冲洗3×3’。
12)甩去PBS液，每张切片加2滴或100ul新鲜配制的DAB或AEC溶液，显微镜下观察3—10分钟，阳性显色为棕色或红色。
13)自来水冲洗，苏木素复染，0.1％HCL分化，0.1％氨水或PBS冲洗返蓝。
14)如果用DAB显色，则切片经过梯度酒精脱水干燥，(二甲苯透明)，中性树胶封固；如果用AEC显色，则切片不能经酒精脱水，而直接用水性封片剂封片。
上海信帆生物公司主要代理产品：
ELISA试剂盒：进口ELISA试剂盒,国产ELISA试剂盒,人elisa试剂盒，大鼠ELISA试剂盒，小鼠ELISA试剂盒等。
培养基：微生物培养基,显色培养基,BD培养基,gibco培养基等。
血清：胎牛血清,人血清,动物血清，NQBB,Hyclone，Gbico原装血清 。
生物试剂：Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等进口试剂。
标准品对照品：进口对照品,进口对照药材,进口标准品.
抗体：一抗,二抗，流式抗体等。
放免试剂盒：进口放免试剂盒，国产放免试剂盒，进口美国凤凰等放免试剂盒。
实验室代测服务：放免代测，WB实验，免疫组化代测，荧光定量PCR代测，病理细胞染色代测，生化实验代测等。
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