联系电话
南京信帆生物技术有限公司
中级会员·14年
- 联系人：
- 刘女士
- 电话：
- 025-66060117
- 手机：
- 17551010836
- 售后：
- 4008-013-053
- 传真：
- 地址：
- 南京市雨花台区凤集大道15号
- 个性化：
- www.xf-bio.com
- 网址：
- www.xf-bio.com
扫一扫访问手机商铺
乳酸脱氢酶试剂盒测定原理
2023-2-28 阅读(476)
乳酸脱氢酶试剂盒测定原理
测定原理：
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
试剂的组成和配制：
提取液：60mL×1 瓶， 4℃保存；
试剂一：液体 5 mL×1 瓶， 4℃保存；
试剂二：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 10μL 试剂五和 1.3 mL 蒸馏水充分溶解备用，用
不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；
试剂三：液体 5 mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：液体 20 mL×1 瓶，4℃保存；
试剂五：液体 100μL×1 支，4℃保存；
样品测定的准备：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104个）：提取液体积（mL）为 1000~5000：1 的比例（建议 2000 万细菌或细胞加入 1mL
提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30
次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，
加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
相关文献支持：
文章标题《丙泊酚介导细胞自噬及Nrf2信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用》
摘要：目的:探讨丙泊酚介导细胞自噬及Nrf2信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:将60只SPF级雄性SD大鼠分为假手术组、模型组和丙泊酚组,每组各20只。采用结扎左冠状动脉前降支法制备MI/RI损伤模型（缺血30 min,再灌注2 h）;丙泊酚组心肌缺血前15 min给予静脉输注丙泊酚6 mg•kg-1•h-1至再灌注2 h,假手术组和模型组静脉输注生理盐水3 mL•kg-1•h-1,再灌注2 h。使用超声心动图观察大鼠心脏功能,ELISA法检测心肌损伤标志物和心肌组织氧化应激因子水平,HE染色观察各组大鼠心肌组织病理变化,Western blot检测心肌组织中自噬和核转录因子E2相关因子2（Nrf2）信号通路相关蛋白水平。结果:LVEF、FS、LVWT、HR和LVSP水平等心功能指标在模型组、假手术组和丙泊酚组的差异均有统计学意义（P<0.05）。模型组CK-Mb、Mb和cTnI水平高于假手术组（P<0.05）,丙泊酚组低于模型组（P<0.05）;
