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ELISA试剂盒操作过程中血清避免的主要因素

时间:2015-2-26阅读:922
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试剂盒能用于小鼠血清,EDTA血浆,细胞上清中白介素-6的定量检测
试剂盒成分预包被板: 抗小鼠白素-6兔子IgG,亲合纯化 96T酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1
标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2 
EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1
标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1
显色剂: TMB底物液 15mL x 1
终止液: 1N硫酸 12mL x 1
浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试试剂没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)
试剂盒血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

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