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用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该目标抗体的微孔中依次参加标本或规范品、生物素化的抗该目标抗体、HRP符号的亲和素,ELISA试剂盒通过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的效果下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的该目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,核算样品浓度。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的效果下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的神经胶质纤维酸性蛋白呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,通过规范曲线核算样品中人神经胶质纤维酸性蛋白浓度。
1.ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液或许会有结晶分出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响成果。
3.各步加样均应运用加样器,并常常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐运用排枪加样。
4.请每次测定的一起做规范曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数后再测定,核算时请zui后乘以总稀释倍数。
5.ELISA试剂盒封板膜只限一次性运用,以避免交叉污染。
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