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做标准曲线样品检测需要注意的问题

时间:2022/8/8阅读:532
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      目前流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合",用这种拟合方式往往能够比较的反映浓度和吸光度的曲线关系,从而进一步比较正确的获得样品中待测物质的浓度值。

      关于标准曲线的拟合方式,直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数等虽都可用于ELISA试剂盒及其它生物学反应中的曲线拟合,但都只适用于曲线的一部分,有的 适用于前半段,有的适用于后半段,有的适用于中间一段,而ELISA试剂盒曲线则对曲线的全部都有较好的适用性。当然,如果用于定量,还是在中间一段较 好。这些方法虽然没有一种方法可以通用,但也都可以用。关键在于你的标准曲线做到了S形的哪一部分,你想检测的样品浓度在曲线的哪一部分。在S曲线的低浓 度部分可以用乘幂方程很好的拟合,ELISA试剂盒中低浓度部分可以用直线方程,中间部分可用对数方程,而中后段可用四参数。
      其实,在一个长的区间内,应该都能拟合得较为理想。但并不是说它就是的。事实上不仅是ELISA试剂盒,其它很多生物学反应都是S形曲 线,也都可以用ELISA试剂盒曲线拟合。但建模型是一回事,而用它来定量是另一回事。如果用来定量,S形曲线的中间段(较陡处)是比较好的,而两端的平 坦部分计算误差会大,有时甚至会很大。

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