当前位置：上海纪宁实业有限公司>>技术文章>>细菌的培养方法及培养基的配置
培养基可以是固体的培养基，也可以是液体培养基。实验室中zui常用的是LB培养基。
实验材料、试剂与主要仪器
（一） 实验材料
大肠杆菌
（二） 试剂
1、胰蛋白胨
2、酵母提取物
3、氯化钠
4、1mol/LNaOH
5、琼脂粉
6、抗生素（氨苄青霉素、卡那霉素等）
（三）仪器
1、培养皿
2、带帽试管
3、涂布器
4、灭菌锅
5、无菌操作台（含酒精灯、接种环、灭菌牙签等）
6、恒温摇床
四、操作步骤
（一）LB培养基的配制
配制每升培养基，应在950m1去离子水中加入：
细菌培养用胰蛋白胨 10g
细菌培养用酵母提取物 5g
NaCl 10g
摇动容器直至溶质*溶解，用1mol/L NaOH调节pH位至7.0。加入去离子水至总体积为lL，在15 lbf／in2 (1.034×105Pa)高压下蒸气灭菌20min，即为LB液体培养基。
LB固体培养基是在其液体培养基的基础上另加琼脂粉15g/L。
（二）细菌的培养
（１）在液体培养基中培养
1、过夜培养
⑴取5ml液体培养基加入一只无菌的试管中。
⑵用接种环或灭菌牙签挑一个单菌落，接种于培养液中。
⑶盖好试管，在摇床上以60r/min速度，于37℃过夜培养。
２、大体积培养
⑴按1∶100的比例将过夜培养物加入到一无菌烧瓶中，烧瓶的体积应该是培养液体积的5倍以上。
⑵于37℃，约300r/min剧烈摇动培养。
（２）在固体培养基中培养 细菌在固体培养基上培养主要是为了获得单菌落和短期保存。平板划线法分离单菌落
⑴采用无菌技术，用接种环将接种物从平板的一侧开始划线。
⑵重新消毒接种环，从一划线处将样品划线至平板的其余部分，重复划线直至覆盖整个平板。
⑶于37℃培养直至长出单菌落。
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