在ELISA实验中，操作技术的影响是检测结果的关键因素之一，需要操作者的用心、细心，且多学习经验。在四初，我公司技术人员特别为客户们的实验整理出总结，做ELISA实验且听上海科兴十个忠告：
一、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孑L壁接触，液滴会自然流下去。吸入液体时的的方法是吸两档打一档，防止由于枪头的毛细作用使得部分液体不能流出而造成的误差。
二、液体全部加入酶标孔后，将酶标板放在桌子上平行轻轻摇晃30s，使液体充分混合均匀，也使其得到充分的反应。
三、尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。
四、手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15～30s，不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中，防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
五、由于底物显色剂对光及其敏感，因此要避光保存。
六、实验前30min将试剂盒中的所有试剂从冰箱取出，使试剂盒中的所有试剂与提取好的样品溶液的温度相同，酶标板只要取出所需量。
七、检测吸光度前应将酶标仪打开，将其预热30min以上。
八、孵育时要使盖板膜封好酶标板，防止水分蒸发，以防曲线不成线性。
九、底物为TMB，避免与皮肤相接触。终止液为2tool的浓硫酸具有腐蚀性，应尽量避免接触皮肤。
十、要确保微量加样器的准确性，可以使用蒸馏水和电子天平进行确定(由于蒸馏水不含杂质，温度环境为20%左右时，lmL的水可以看作是lg、20L的水可以看作是0.2g)每一把微量加样器都应该将其zui高量程和zui低量程进行确定。
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