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上海科兴商贸有限公司
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阅读:494发布时间:2015-6-30
原发性免疫缺陷病是一组由免疫系统的遗传缺陷而引起的疾病,大约有200多种,其特点是严重、反复出现且危及生命的感染。目前的检测方法包括细胞毒性分析和流式细胞术。
如今,通过新一代测序,多重诊断分析允许对多个基因同时进行分析。Nilsson认为,这也许是诊断变异的*方法。不过,他也指出,这些基因之外的致病变异就无法被发现。
遗传检测能协助医生确定治疗策略。然而,与PID相关的基因有200多个,往往不太清楚应当检测哪些基因。不同基因中的突变可能导致类似的表型,而相同基因中不同部分的突变却可能出现不同的表型。重要的是,实验室认证的检测有时只覆盖一小部分致病基因,因此检测需要被分到不同的实验室。
研究人员利用QIAGEN的FlexiGene DNA Kit从全血中提取DNA。对于某些患者,血液也利用PreAnalytix的Paxgene Blood RNA*来采集。然后他们利用Paxgene Blood RNA Kit来提取RNA,其中500 ng用于罗氏First-strand cDNA synthesis for RT-PCR的cDNA合成。研究人员设计出靶向富集分析,覆盖与PID相关的179个基因的所有外显子。随后由GATC Biotech在Illumina的GAIIx系统上开展高通量测序。
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