大鼠抗小鼠整合素α5β1抗体的产生
要产生的抗体对小鼠整合素α5β1，免疫Sprague-Dawley大鼠，小鼠α5β1-Fc融合蛋白，或从小鼠胎盘与亲和纯化的整合。从得到的杂交瘤的上清液进行了一些实验设计，以确定涵盖定义volociximab的特性，包括异源二聚体特异性，阻断活性，高亲和力Fc融合蛋白的结合，并结合到内皮细胞产生的抗体的克隆。超过60个克隆进行了筛选，这些功能特性。
选定抗体代表结合特性的范围内。这些包括α5,β1或α5β1异二聚体的特异性抗体,通过ELISA确定,和跨接的相对亲合力的范围内和阻止α5β1纤维连接蛋白的结合能力。有趣的是，一种抗体，321.1，增加整合素结合的纤连蛋白，这表明它可能识别的配体诱导的结合位点（LIBS）。一般而言，大多数α5-β1-和α5β1异二聚体-特异性抗体确认整合素α5β1在永生化的血管内皮细胞。两者合计这些测定确定了一些类似的抗体，该抗体在体外的volociximab。
交叉反应性检测
Volociximab不绑定到小鼠α5β1，在这个关键的功能表位小鼠和人类之间存在分歧。一些抗体的交叉反应性的人整合，包括大多数α5，异源二聚体的特异性抗体，所有这些测试绑定β1。的免疫组化分析，从人α5β1阳性（MDA-MB-231）和负极（C32）进一步证实的异种移植肿瘤的抗体交叉反应的人整合通过ELISA也这样做组织切片上的部分。517-2，该交叉反应通过ELISA，例如，对肿瘤细胞结合的α5β1阳性的MDA-MB-231异种移植中，和不C32异种移植肿瘤的细胞，但结合到小鼠α5β1两个异种移植物的血管和基质上。抗体339.1上，另一方面，不交叉反应，用ELISA法对人类整合和不绑定的MDA-MB-231或C32的异种移植物中肿瘤细胞，但它识别小鼠的船只上α5β1和基质。因此，代表面板的抗体，抗体结合人α5β1和那些不。
