振荡与培养基密封培养法
振荡培养法
将试管或瓶子中的固体培养基熔化后接种，再使之凝固。所用的zui简单的培养基是加人1%葡萄糖的营养琼脂。
（1）将培养基液化，并在100℃保持10min以去掉所有溶解的氧,冷却至45℃，立即使用。
（2）加入接种物,用手旋转试管使试管内容物*混合，并注意不要产生气泡。
（3）将试管放入冷水中以使琼脂凝固。
（4）在所需的温度下培养。
因为氧穿透固体培养基的速度很慢，因此试管的底部很适合于厌氧菌的生长，这种方法对于微需氧菌和兼性厌氧菌也很适用。
培养基密封培养法
使用无菌的密封物质可以无菌地保存液体培养基。含有液体培养基的试管应在沸水浴中加热10min以驱除溶解的氧，然后加入已灭菌的液态凡士林或石蜡密封以隔绝空气。 接种时可将凡士林熔化，用毛细吸管吸取菌液接种（或者是将试管加热，冷却后立即接种，然后再用无菌的密封物质密封I
通过快速凝结反应,该方法可用来证明水或牛乳中的产气荚膜梭状芽孢杆菌，所用的 培养基是无氧的灭菌牛乳，按上述方法进行密封。
Vaspar是一种非常有用的密封物质，它是将凡士林和石蜡以相同的比例混合熔融后制成。在培养基中加人熔化的Vaspar并使其固化后，用火焰慢慢地加热试管的
Vaspar部分，使固化的Vaspar重新熔化并与试管壁紧密粘连以隔绝接触面的空气。灭菌 的石蜡也能起到培养基密封的作用，但它不能检测气体的产生，而且会冇一些氧穿过液体石蜡密封层而溶解到培养基中。
