细胞名称BT-474[BT474]（人乳腺导管癌细胞）
种属人
年龄（性别）女；60岁
组织来源乳腺导管癌
生长特性贴壁
细胞形态上皮细胞样背景描述BT-474[BT474]细胞是由E·Lasfargues和W·G·Coutinho从一个实心的乳腺浸润性导管癌中分离到的细胞株。
生长培养基RPMI-1640＋10%FBS＋10μg/ml Insulin＋2mM L-glutamine＋1%P/S
培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃
BT-474[BT474]人乳腺导管癌细胞复苏时如何换液呢？
1冻存细胞取出后37℃速溶，取15ml离心管，加入10ml含血清培养基，将冻存管中液体（通常1.5ml）也加入离心管中，习惯轻吹几下混匀，1200转常温离心5min，去掉上清，加入5ml含血清培养基，轻吹制成细胞悬液，加入到培养瓶中，即可。
注意，新复苏的BT-474[BT474]人乳腺导管癌细胞不要经常去看去动。
换液的话，只要把培养基吸出，再加入新的培养基就可以了
如果你复苏的细胞长得很不均匀，可以胰mei消化下来再混匀后在重新加进去（像正常细胞一样做）。
两种方案可供选择：
一、复苏时，行离心，弃上清后，种入瓶中。主要目的是防止DMSO对细胞造成损害，但刚复苏的细胞教脆弱，离心易导致细胞破碎。
二、BT-474[BT474]人乳腺导管癌细胞复苏时，直接将冻存管里的液体倒入培养瓶中，另外添加适量的培养基，孵箱24h，待贴壁后行常规换液。省去了离心一步，避免离心时细胞破裂。但DMSO未能去除，长时间培养可能会对细胞有损害。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完quan培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完quan培养基来培养细胞。收到细胞后第yi次传代建议T25培养瓶1：2传代。
