小鼠精母细胞
平台编号:zl-057171
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
细胞信息:GC-2spd(ts)
产品信息
名称GC-2spd(ts)(小鼠精母细胞)(种属鉴定正确)
别称GC-2
种属小鼠
年龄（性别）6周龄
组织来源精母细胞；SV40大T抗原转染
生长特性贴壁细胞
细胞形态上皮细胞样
背景描述The cells have lost their differentiation potential,and are currently arrested at a premeiotic stage.
生物安全等级2
生长培养基DMEM＋10%FBS＋1%P/S
推荐传代比例1:4-1:6
推荐换液频率2~3次/周
冻存条件
冻存液：55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
温度：37℃
应用领域This cell line may be useful for the study of spermatogenesis.
保藏机构ATCC;CRL-2196 BCRC;60313
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细胞处理
1）冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完，全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完，全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完，全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达70%-90%，即可进行传代培养。
该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞，传代可以参考以下方法：
1.收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
2.加入0.25％（w/v）胰，蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完，全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
