人凋亡抑制因子3（BIRC4/API3）ELISA试剂盒说明书

人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA试剂盒
英文简称：Apoptosis inhibitor 3 (BIRC4 / API3) ELISA kit

产品货号：KS14623

品牌名称：科顺生物 
产品规格：96T/48T
运输方式：快递(根据客户要求，选择具体的运输方式)
产品价格：*，欢迎在线留言洽谈！
使用范围：仅供科研检测,不得用于临床.

人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA试剂盒实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素（INS）水平。用纯化的小鼠胰岛素（INS）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入小鼠胰岛素（INS），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠胰岛素（INS）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素（INS）含量。

人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA试剂盒组成：

注：标准品浓度依次为：40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA试剂盒样本处理及要求：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA试剂盒操作步骤

• 标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。
• 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
• 加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。
• 温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
• 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
• 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
• 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 
• 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
• 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA试剂盒注意事项：

• 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
• 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
• 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zuei好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
• 请每次测定的同时做标准曲线，zuei好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第yi孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。
• 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
• 底物请避光保存。
• 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
• 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
• 本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

计算：

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，    

在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD      

值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释      

倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标      

准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值      

代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释      

倍数，即为样品的实际浓度。                  

人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA试剂盒相关优质产品:

KS15204 人糖类抗原50(CA50)ELISA试剂盒

KS15205 人糖类抗原724(CA724)ELISA试剂盒

KS15206 人糖原合成酶激酶3(GSK3)ELISA试剂盒

KS15207 人糖原磷酸化酶(GP)ELISA试剂盒

KS15208 人糖脂抗体(glycolipid)ELISA试剂盒

KS15209 人天门冬氨酰tRNA合成酶(DARS)ELISA试剂盒

KS15210 人天青杀素/肝素结合蛋白(AZU/HBP)ELISA试剂盒

KS15211 人调宁蛋白1(CNN1)ELISA试剂盒

KS15212 人铁蛋白(Ferritin)ELISA试剂盒

KS15213 人铁蛋白重链(FTH)ELISA试剂盒

KS15214 人铁过氧化物岐化酶(FeSOD)ELISA试剂盒

KS15215 人铁调素(Hepc)ELISA试剂盒

KS15216 人铁调素25(Hepc25)ELISA试剂盒

KS15217 人同源框A3(HOXA3)ELISA试剂盒

KS15218 人铜锌过氧化物岐化酶(SOD1)ELISA试剂盒

KS15219 人透明质酸蛋白聚糖连结蛋白1(HAPLN1)ELISA试剂盒

KS15220 人透明质酸结合蛋白2(HABP2)ELISA试剂盒

KS15221 人突触回蛋白2(SYNJ2)ELISA试剂盒

KS15222 人突触泡蛋白(SYP)ELISA试剂盒

KS15223 人突触泡蛋白抗体(SYPAb)ELISA试剂盒

KS15224 人脱γ羧基凝血酶原(DCP)ELISA试剂盒

KS15225 人脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒

KS15226 人脱氧皮质酮(DOC)ELISA试剂盒

KS15227 人唾液过氧化物酶(SP)ELISA试剂盒

KS15228 人蛙皮素(BBS)ELISA试剂盒

KS15229 人微管多特异性有机阴离子转运蛋白1(ABCC2)ELISA试剂盒

KS15230 人微管多特异性有机阴离子转运蛋白2(ABCC3)ELISA试剂盒

KS15231 人微管微丝交联因子1(MACF1)ELISA试剂盒

KS15232 人微管相关蛋白1A/1B轻链3A(MAP1LC3A)ELISA试剂盒

KS15233 人微管相关蛋白1A/1B轻链3B(MAP1LC3B)ELISA试剂盒

KS15234 人维生素B3(VB3)ELISA试剂盒

KS15235 人维生素D结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒

KS15236 人维生素H(VH)ELISA试剂盒

KS15237 人维生素K依赖蛋白Z(PROZ)ELISA试剂盒

KS15238 人尾加压素2(UST2)ELISA试剂盒

KS15239 人尾肢同源蛋白2(PYGO2/PP7910)ELISA试剂盒