当前位置:合肥莱尔生物科技有限公司>>生化试剂盒>>土壤系列>> 土壤亚硝酸还原酶试剂盒-可见分光光度法
规格 | 50T/100T | 仪器 | 分光光光度计/酶标仪 |
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运输 | 常温 | 保质期 | 三个月 |
品牌 | 莱尔生物 | 订购方式 | 联系客服 |
保存 | 按说明书 | 货期 | 现货 |
土壤亚硝酸还原酶试剂盒-可见分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
规格: 50 管/24 样
产品内容:
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。 (临用前加10mL蒸馏水充分溶解)
试剂三:液体10mL×1瓶,4℃保存。
试剂四:液体25mL×1瓶,4℃避光保存。 (使用前50℃加热溶解)
试剂五:液体25mL×1瓶,4℃保存。
土壤亚硝酸还原酶试剂盒-可见分光光度法产品说明:
土壤亚硝酸还原酶是反硝化作用中的关键酶之一,参与亚硝酸盐至NO的还原反应,它的活性反
映了生物降解过程中氮素的转化效率,为氮素转化规律的研究提供一定的依据。
亚硝酸还原酶可将NO2- 还原为NO ,使样品中参与重氮化反应生成紫红色化合物的NO2- 减少
,即540nm处吸光值的变化可反应土壤中亚硝酸还原酶的活性。
自备实验用品及仪器:
天平、可见分光光度计、水浴锅、低温离心机、1mL玻璃比色皿。
土壤亚硝酸还原酶试剂盒-可见分光光度法测定操作:
空白管 | 对照管 | 测定管 | 无底物管 | |
风干土样(g) | 0.1 | 0.1 | ||
蒸馏水(μL) | 200 | 200 | ||
试剂一(μL) | 200 | 200 | ||
试剂二(μL) | 200 | 200 | 200 | 200 |
混匀后,25℃反应1h | ||||
试剂三(μL) | 200 | 200 | 200 | 200 |
充分震荡30s ,1000rpm ,4℃ ,离心10min | ||||
上清液(μL) | 500 | 500 | 500 | 500 |
试剂四(μL) | 500 | 500 | 500 | 500 |
试剂五(μL) | 500 | 500 | 500 | 500 |
充分混匀,室温静置显色 10min ,用蒸馏水调零,于 1mL 玻璃比色皿中测定 540nm 各管 吸光值(参照注意事项二) ,分别记为 A 空白管、A 对照管、A 测定管、A 无底物管。A 空白管和A 无底物管只需各做一管。 |
酶活单位定义: 每g土样每24h还原1μmol NO2ˉ的量为一个酶活力单位。
S-NiR(μmol /d/g干重) =底物消耗量( μmol)÷W÷T
=C标准×[(A空白管-A 无底物管)-(A测定管-A对照管)]÷(A空白管-A无底物管)×V加样÷W÷T C标准: 标准品浓度为72.5μmol /ml;V加样: 反应体系加入样本的体积,0.2mL;T:反应时间, 1h=1/24d; W:样本质量,g。
土壤亚硝酸还原酶试剂盒-可见分光光度法注意事项:
1. 配制好的试剂二需 3天内使用完。
2. 若吸光值超过2 ,将上清液用蒸馏水(无亚硝酸盐污染) 进行适当的稀释后再加入工作液显色, 并在计算公式中乘以稀释倍数。
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