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规格 | 50T/100T | 仪器 | 分光光光度计/酶标仪 |
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运输 | 常温 | 保质期 | 三个月 |
品牌 | 莱尔生物 | 订购方式 | 联系客服 |
保存 | 按说明书 | 货期 | 现货 |
土壤碱性蛋白酶试剂盒-可见分光光度法注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
规格:50T/24S
产品内容:
试剂一:液体20mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入10mL试剂一,沸水浴搅拌溶解后待用;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入10mL 蒸馏水充分溶解待用;
试剂四:液体40mL×1 瓶,4℃保存; 试剂五:液体10mL×1 瓶,4℃保存;
标准品:液体2mL×1 支,0.2 μmol/mL 酪氨酸溶液,4℃保存;
土壤碱性蛋白酶试剂盒-可见分光光度法产品说明:
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。土壤碱性蛋白酶在碱性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。碱性条件下,土壤碱性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝,在680nm 有特征吸收峰。
实验中所需仪器及设备:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、甲苯、蒸馏水、50目筛(或更小)。
样品处理:
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30~50 目筛。
土壤碱性蛋白酶试剂盒-可见分光光度法操作步驟:
1、分光光度计预热30min 以上,调节波长至680nm,蒸馏水调零。
2、样本测定:
试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
风干土样(g) | 0.1 | 0.1 | - | - |
试剂一(μL) | 100 | 100 | - | - |
试剂二(μL) | 200 | - | - | |
混匀后,37℃反应24h,期间振荡5-6 次,使土样与反应液充分接触。 | - | - | ||
试剂三(μL) | 200 | 200 | - | - |
试剂二(μL) | - | 200 | - | - |
混匀,10000rpm 室温离心10min,取上清液 | - | - | ||
上清液(μL) | 220 | 220 | - | - |
标准液(μL) | - | - | 220 | - |
蒸馏水(μL) | - | - | - | 220 |
试剂四(μL) | 650 | 650 | 650 | 650 |
试剂五(μL) | 130 | 130 | 130 | 130 |
混匀,40℃水浴 10min,10000rpm 室温离心 10min,取上清液于 680nm 下读取各管吸光值 A,分别记为 A 测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管,计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。 |
注意:
标准管、空白管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
土壤碱性蛋白酶试剂盒-可见分光光度法活性计算:
单位定义:每天每g土样产生1μmol 酪氨酸为一个土壤碱性蛋白酶活力单位。
土壤碱性蛋白酶(U/g)=C标准×ΔA测定÷ΔA标准×V 反总÷W÷T= 0.1×ΔA测定÷ΔA标准÷W。
C 标准管:标准管浓度,0.2 μmol/mL;V 反总:反应体系总体积,0.5mL;T:反应时间,
1d;W:样本质量。
注意事项:
1、当吸光值大于1时,建议将上清液稀释后进行测定,计算时注意乘以稀释倍数。
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