土壤碱性磷酸酶(S-AKP/ALP)测试盒 返回列表页

土壤碱性磷酸酶(S-AKP/ALP)测试盒注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

可见分光光度法

规格: 50T/48S 

产品简介：

土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷化合物矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 pH 显著影响。通常按照其最适 pH 范围，分为碱性、中性和酸性三种类型磷酸酶。

碱性环境中，S-AKP/ALP 催化磷酸苯二钠水解生成苯fen和磷酸氢2钠，通过测定酚的生成量即可计算出 S-AKP/ALP 活性。

土壤碱性磷酸酶(S-AKP/ALP)测试盒产品内容：

试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。用前加 50mL 蒸馏水充分溶解。试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。

试剂四：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加 1152µL 无水乙醇（自备），48 µL 蒸馏水充分溶解。（变褐色后不能再使用）

标准品：液体 1mL×1 支，0.5µmol/mL 苯fen标准液，4℃保存。

土壤碱性磷酸酶(S-AKP/ALP)测试盒试验中所需的仪器和试剂：

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯（不允许快递）。

操作步骤：

催化反应：

称取风干混匀土壤约 0.1g，加入 0.05mL 甲苯（自备），轻摇 15min；加 0.4 mL 试剂一并且摇匀后，置于 37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应 24h；到时后迅速加入 1mL 试剂二充分混匀，以终止酶催化的反应。10000rpm 室温离心 10min，取上清液置于冰上待测。

显色反应：

1.分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 660 nm，蒸馏水调零。

2.空白管：取 1mL 玻璃比色皿，加入 50 µL 试剂一，100 µL 试剂三，20 µL 试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水 830 µL，混匀后室温静置 30 min，于 660 nm 测定吸光度，记为 A 空白管。

3.标准管：取 1mL 玻璃比色皿，加入 50 µL 标准液，100 µL 试剂三，20 µL 试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水 830 µL，混匀后室温静置 30 min，于 660 nm 测定吸光度，记为 A 标准管。

4.测定管：取 1mL 玻璃比色皿，加入 50 µL 上清液，100 µL 试剂三，20 µL 试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水 830 µL，混匀后室温静置 30 min，于 660 nm 测定吸光度，记为 A 测定管。

土壤碱性磷酸酶(S-AKP/ALP)测试盒S-ALP 活性计算：

活性单位定义：37℃中每克土壤每天释放 1µmol 酚。

S-AKP/ALP（U/g 土样）=[C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]×V 总÷W÷T×1000

= 725×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷W

C 标准液：0.5µmol/L；V 总：催化体系总体积，1.45mL；W：土壤样品质量，g；T：催化反应时间，

24 h=1 d。