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游离胆固醇（FC）检测试剂盒测定意义：

FC 氧化酶催化 FC 生成△4-胆甾烯酮和 H2O2，过氧化物酶催化 H2O2、4-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物，在 500nm 有吸收峰，其颜色深浅与 FC 含量成正比。
自备实验用品及仪器：
水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、和蒸馏水。
试剂组成和配置：
试剂一：异丙醇 100mL（自备）；
工作液：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；
标准品：液体 1mL×1 支，浓度为 0.5 μ mol/mL，4℃避光保存。
FC 的提取：
1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌：先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加 1mL 试剂一，超声波破碎 1min（强度20％，超声 2s，停 1s），即 FC 待测液。
3. 血清（浆）样品：直接测定。
游离胆固醇（FC）检测试剂盒测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min，调节波长到 500 nm，蒸馏水调零。
2. FC 工作液在 40℃水浴中预热 30min。
3. 标准管：依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 50μ L FC 标准液和 150μ L FC 工作液，混匀，静置24h 后于 500nm 测定 A 标准管。
4. 测定管：依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 50μ L FC 待测液和 150μ L FC 工作液，混匀，静置24h 后于 500nm 测定 A 测定管。
游离胆固醇（FC）检测试剂盒计算公式：
1. 血清（浆）中 FC 含量计算：
FC 含量（μ mol /dL）= C 标准液×A 测定管÷A 标准管×100mL
=50×A 测定管÷A 标准管 C 标准液：0.5μ mol/mL；100 mL：1dL=100 mL。
2. 组织中 FC 含量计算： (1)按样本蛋白浓度计算
FC 含量（μ mol / mg prot）= C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷Cpr
= 0.5×A 测定管÷A 标准管÷Cpr

(2)按样本鲜重计算
FC 含量（μ mol / g 鲜重）= C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷W
= 0.5×A 测定管÷A 标准管÷W
C 标准液：0.5μ mol/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g/mL
3. 细胞、细菌中 FC 含量计算：
FC 含量（μ mol /104 cell）= C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷细菌或细胞（104 cell /L）
=0.5×A 测定管÷A 标准管÷细菌或细胞（104 cell /L） C 标准液：0.5μ mol/mL。
游离胆固醇（FC）检测试剂盒检出限为 1nmol/mL