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磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒

参  考  价:3600 - 7100
具体成交价以合同协议为准
  • 型号

  • 品牌

  • 厂商性质

    生产商

  • 所在地

    合肥市

规格

50T 3600元 99盒可售

100T 7100元 99盒可售

更新时间:2021-06-18 22:17:19浏览次数:183次

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规格 50T/100T 仪器 分光光度计/酶标仪
运输 常温/2-8℃ 保质期 三个月
品牌 合肥莱尔生物科技有限公司 订购方式 联系客服
保存 详情见说明书 货期 现货
磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒生物类样本均可检测。
分光光度法:主流测定体系为1mL,测试仪器分管光度计,能够最大限度地满足绝大多数用户的需要。
微量法:主流测定体系为0.2mL,测试仪器酶标仪或分管光度计,测定更加简便快捷。

磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒测定意义:磷脂酶 A2(EC3.1.1.4)是磷脂 sn-2 位脂酰基水解酶,广泛存在于动植物组织、细菌、细胞核分泌物中,参与脂肪消化,精zi成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程,在控制体内磷脂类物质平衡、调节机体新陈代谢、参与疾病的病理进程等方面发挥着及其重要的作用。

测定原理:

磷脂酶 A2 作用于 2-硫代十六酰乙基磷酸胆碱(HEPC)产生游离巯基,与 DTNB 反应生成黄色物质,在412nm 处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器:

天平、超速冷冻离心机、研钵、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。

试剂组成和配制:

提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。试剂二:液体50mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体×5 瓶,-20℃避光保存。临用前根据用量每瓶加入 4.5mL 试剂二充分混匀; 用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒样品处理:

1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,10000g 离心 5min,取全部上清于 4℃、100000g 离心 30min,弃上清,取沉淀溶于 1mL 试剂一。

2. 细胞:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后于4℃,10000g 离心 5min,取全部上清于 4℃、100000g 离心 30min,弃上清,取沉淀溶于 1mL 试剂一。

3. 血清:直接测定。

测定操作:

 

对照管

测定管

样品(μ L)

100

100

试剂二(μ L)

900

 

试剂三(μ L)

 

900

充分混匀,37℃反应 10min,于 1mL 玻璃比色皿,蒸馏水调

零,测定 412nm 处吸光值,记为 A 对照管和A 测定管,△A=A 测定管- A 对照管

磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒计算公式:

按照蛋白浓度计算

酶活性定义:每毫克蛋白每分钟水解 HEPC 产生 1nmol 游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。PLA2 活性(nmol/min/mg prot)= △A÷( e ×d)×V 反总÷(V 样×Cpr)÷T

= 73.53×△A÷Cpr

2. 按照样本质量计算

酶活性定义:每克组织每分钟水解 HEPC 产生 1nmol 游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。PLA2 活性(nmol/min/g 鲜重)= △A÷( e ×d)×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)÷T

= 73.53×△A÷W

3. 细胞数量计算

酶活性定义:每104 个细胞每分钟水解HEPC 产生1nmol 游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。PLA2 活性(nmol/min/104 cell)= △A÷( e ×d)×V 反总÷(V 样×细胞数量÷V 样总)÷T

= 73.53×△A÷细胞数量

4 按照液体体积计算

酶活性定义:每毫升血清每分钟水解 HEPC 产生 1nmol 游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。PLA2 活性(nmol/min/mL)= △A÷( e ×d)×V 反总÷V 样÷T

= 73.53×△A

磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒e :TNB 消光系数,13600L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,1mL;V 样: 反应体系中加入样本体积,0.1mL;W:样本质量,g;V    样总:加入提取液体积,1mL; T:反应时间,10min

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