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| 规格 | 50T/100T | 仪器 | 分光光度计/酶标仪 |
|---|---|---|---|
| 运输 | 常温/2-8℃ | 保质期 | 三个月 |
| 品牌 | 合肥莱尔生物科技有限公司 | 订购方式 | 联系客服 |
| 保存 | 详情见说明书 | 货期 | 现货 |
纤维素酶（CL）检测试剂盒说明书，注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
货号：YX-C-B610
规格：50T/24S
产品说明：
CL（EC 3.2.1.4）存在于细菌、真菌和动物体内，能够催化纤维素降解，是一类可广泛应用于医药、食品、棉纺、环保及可再生资源利用等领域的酶制剂。采用3.5－二硝基水杨酸法测定CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容：
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂三：液体 13mL×1 瓶，4℃保存；
标准品：粉剂×1 支，4℃保存，含 10mg 无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入 1mL 蒸馏水溶解，配制成 10mg/mL 葡萄糖溶液备用，4℃可保存 1 周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至 1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0mg/mL。
纤维素酶（CL）检测试剂盒操作步骤：
一、样品测定的准备：
1、细菌或细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声冰浴破碎细菌或细胞（功率 20％，超声 3S 秒，间隔 10S，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：称取约 0.1g 组织加入 1mL 提取液，冰浴中匀浆。8000g ，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
二、加样表和测定步骤：
试剂名称（μL） | 对照管 | 测定管 | 标准管 |
试剂一 | 50 | 50 | - |
试剂二 | 200 | 200 | - |
双蒸水 | 50 | 50 | - |
样本 |
| 50 | - |
煮沸的样本 | 50 |
| - |
混匀，40℃准确水浴 30min，取出后立即放入沸水中煮沸 15min,得糖化液 | |||
糖化液 | 50 | 50 | - |
标准液 | - | - | 50 |
试剂三 | 150 | 150 | 150 |
混匀， 沸水浴中煮沸显色 15min，冷却 | |||
双蒸水 | 1050 | 1050 | 1050 |
纤维素酶（CL）检测试剂盒混匀，540nm 处蒸馏水调零，测定吸光值 A，样品管计算ΔA=A 测定管-A 对照管。
标准曲线的建立：540nm 处以标准管 0mg/mL 调零，读标准管吸光值 A。以浓度（y）为纵坐标，吸光度 A（x）为横坐标建立标准曲线。
CL 活力计算：
根据标准曲线，将ΔA 带入公式中（x）计算样品浓度 y（mg/mL）。
1、按照蛋白浓度计算
单位的定义：每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL 活力（U /mg prot）＝1000×y×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T=233×y÷Cpr
2、按样本鲜重计算
单位的定义：每 g 组织在反应体系中每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL 活力（U/g 鲜重）＝1000×y×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）÷T =233×y÷W
3、按细菌或细胞密度计算
纤维素酶（CL）检测试剂盒单位的定义：每1 万个细菌或细胞在反应体系中每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。CL 活 力 （U/104 cell）＝1000×y×V 反 总 ÷（500×V 样 ÷V 样 总 ）÷T =0.467×y 1000：1mg/mL=1000μg/mL；V 反总：反应体系总体积，0.35mL； V 样：加入样本体积，0.05 mL； V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，30 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万
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