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规格 | 50T/100T | 仪器 | 分光光光度计/酶标仪 |
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运输 | 常温 | 保质期 | 三个月 |
品牌 | 合肥莱尔生物科技有限公司 | 订购方式 | 联系客服 |
保存 | 按说明书 | 货期 | 现货 |
土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)检测试剂盒说明书,注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
测定原理:木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在 310nm 处有特征吸收峰。
土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)检测试剂盒自备实验用品及仪器:天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存。
样品处理:
新鲜土样风干,过 30-50 目筛。
测定操作:
| 对照管 | 测定管 |
土样(g) | 0.04 | 0.04 |
甲苯(μ L) | 30 | 30 |
25℃静置 15min | ||
试剂一(μ L) |
| 100 |
蒸馏水(μ L) | 100 |
|
试剂二(μ L) | 60 | 60 |
试剂三(μ L) | 40 | 40 |
30℃震荡反应 3h,冰浴 5min,10000g,4℃离心 10min,取上清 150μ L,于微量石英比色皿/96 孔板,测定 310nm 处吸光值,分别记为 A 对照和 A 测定,△A=A 测定- A 对照 |
土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)检测试剂盒酶活计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
酶活性定义:每克土壤每天氧化 1nmol 藜芦醇所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP 活性(nmol/d /g 土样)=
DA
e ´ d
×V 反总÷W÷T= 172×△A÷W
ε :藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,0.2mL;
W:样本质量,g;T:反应时间,3h
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
酶活性定义:每克土壤每天氧化 1nmol 藜芦醇所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP 活性(nmol/d /g 土样)=
DA
e ´ d
×V 反总÷W÷T= 344×△A÷W
土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)检测试剂盒ε :藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d:比色皿光径,0.5cm;V 反总:反应总体积,0.2mL; W:样本质量,g;T:反应时间,3h
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