CY3-Isothiocyanate,CY3-ITC,CY3-异硫氰酸酯制备方法
CY3-Isothiocyanate (CY3-ITC) 是一种具有荧光特性的染料衍生物,常用于生物标记和分子探针。它的制备通常涉及CY3染料和异硫氰酸酯基团(-NCS)的结合。异硫氰酸酯基团可以与氨基(例如蛋白质上的氨基)反应,形成稳定的共价键,从而实现对目标分子的标记。
制备步骤
1. 准备反应物
CY3染料:选择合适的CY3染料衍生物(如CY3-NHS酯或CY3-氨基)作为起始物料。常用的是CY3-NHS酯(NHS酯化合物),因为它可以与亲核基团反应。
异硫氰酸酯试剂:选择异硫氰酸酯(R-NCS)试剂,通常需要与相应的溶剂(如无水二甲基亚砜(DMSO)或氯仿)混合溶解。常用的异硫氰酸酯化学试剂为苯基异硫氰酸酯(Phenyl Isothiocyanate, PITC)或烷基异硫氰酸酯。
2. 反应步骤
溶解CY3染料:将CY3染料(例如CY3-NHS酯)溶解在合适的溶剂中(如二甲基亚砜(DMSO)或无水乙腈)。使用适当浓度(通常在1-10 mM范围内)以确保反应的充分性。
溶解异硫氰酸酯:将异硫氰酸酯(例如苯基异硫氰酸酯,PITC)溶解在适当的溶剂中(如DMSO、氯仿或无水乙醇)。异硫氰酸酯的浓度应为2-3倍CY3染料的浓度。
反应条件:在冷藏条件下(通常在0-4°C之间),将异硫氰酸酯加入CY3染料溶液中。反应时间可以根据需要进行调整,通常为2-4小时。此反应时间确保异硫氰酸酯基团与CY3染料发生反应。
反应监控:使用紫外-可见光光谱(UV-Vis)或高效液相色谱(HPLC)监控反应进程,以确保异硫氰酸酯与CY3的反应完成。可以观察CY3染料的吸收峰的变化来确认反应是否成功。
3. 反应后处理
去除溶剂和未反应物:反应完成后,可以使用旋转蒸发(rotary evaporator)或透析去除反应体系中的溶剂和未反应的试剂。对于水溶性产物,透析是一种常见的清除方法;对于有机溶剂溶解的产物,可以通过反相色谱或凝胶渗透色谱进行纯化。
沉淀和干燥:根据需要,可以将反应产物在低温下沉淀出来,然后用适当的溶剂(如乙醇或乙酸乙酯)清洗,去除未反应的物质。干燥产物以获得最终的CY3-Isothiocyanate。
纯化:可以通过反相高效液相色谱(HPLC)进一步纯化反应产物,确保获得高纯度的CY3-异硫氰酸酯。纯化时可以选择适当的流动相和梯度条件,以分离纯化产物。
产品名称:CY3-Isothiocyanate,CY3-ITC,CY3-异硫氰酸酯
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.03.04
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