怎样用荧光染料标记蛋白?FITC标记的操作步骤
荧光染料蛋白体外标记
荧光染料标记蛋白或多肽是常见的蛋白体外标记,除了GFP等融合表达荧光蛋白之外,目标蛋白经过荧光染料标记可以直接进行活体示踪、细胞分选等下游实验操作。
原理:荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。蛋白荧光标记利用荧光物质共价结合在目标分子的某个基团上,利用它的荧光性质来提供被研究对象的信息。
应用和特点:活化的荧光染料,例如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、罗丹明B(Rhodamine B)或Alexa Fluor染料等,可用于标记抗体或蛋白功能基团,生成分子探针并通过荧光成像进行检测。当用荧光染料化学标记性抗体或其他纯化的生物分子时,它们成为用于检测靶抗原或相互作用配偶体的荧光探针,应用于细胞成像、流式细胞术、印迹和酶联吸附实验(ELISA)。因为荧光标记物具有无放射物污染、操作简便等特点,使其在蛋白功能研究、科研筛选等许多研究领域的应用日趋。
荧光标记的蛋白、种类:
牛血清白蛋白BSA
人血清白蛋白HAS
转铁蛋白Transferrin
血蓝蛋白(KLH)
刀豆球蛋白Concanavalin A
过氧化氢酶Catalase
络蛋白Casein
卵清蛋白、乳清蛋白Ovalbumin
组蛋白histone
胶原蛋白Collagen
链霉亲和素Streptavidin from Streptomyces avidinii
氯化血红素;血晶素Hemin
牛球蛋白
转铁蛋白Transferrins
粘蛋白Mucin
FN纤粘连蛋白Fibronectin
乳铁蛋白Lactoferrin
玉米蛋白Zein, from Corn
鱼精蛋白Protamine Sulfate from Salmon sperm
肌红蛋白(肌球蛋白)Myoglobin
马脾铁蛋白HSF
肌动蛋白Actin
甲状腺球蛋白Thyroglobulin
肝素Heparin
胰岛素Insulin
文献定制产品:
FITC标记的转铁蛋白(Tf-FITC)
FITC标记重组灵芝调节蛋白
FITC标记的GSTP1蛋白
FITC标记链霉亲和素
FITC标记蛋白
FITC标记卵清蛋白OVA
FITC标记牛血清白蛋白BSA
FITC标记鬼笔环肽
FITC标记I型胶原
荧光素FITC标记牛血清白蛋白FITC-BSA/BSA-FITC的实验操作步骤Albumin-Bovine-Serum-FITC的合成方法及使用材料
【产品材料】
1、异硫氰酸荧光素(FluoresceinIsothiocyanate,FITC)异构体I(IsomerI),M.W:389.4发射光谱(吸收光谱)493nm,荧光光谱550nm
2、牛血清白蛋白(BSA),M.W:68000,纯度98%。(AlbuminBovineSerum)
3、标记缓冲液:0.5MpH9.5C.B,洗脱液:0.01MpH7.2PBS
【标记方法】 直接标记法,RT2.5~3.0hs,离心后过SephadexG-50,0.01MpH7.2PBS洗柱,洗脱液为0.01MpH7.2PBS。
【质量分析】 溶液为0.01MpH7.2PBS,蛋白浓度为5.12mg/ml左右,FITC浓度为30~45ug/ml,含有2~5/万NaN3防腐,每支0.5ML。
【保存温度】-20℃冻存二年以上。
【应用范围】
1、用于、、梅螺旋体、钩端螺旋体等微生物的抗原或抗体检查。
2、自身病的多种自身抗体荧光检查,如抗核抗体,抗心肌抗体等。
3、细胞因子等检查的荧光流式细胞仪测定。
4、白细胞分型抗原的荧光染色。
5、及病理中抗原,抗体检查,如抗原检查。
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,智慧城市网对此不承担任何保证责任。
温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。